改良克氏双糖铁培养基中含有少量的葡萄糖和大量的山梨醇，常用于小肠结肠炎耶尔森氏菌的检验。
首先，用接种针挑取试验菌苔，“之”字划线接种于改良克氏双糖铁培养基斜面处，之后底层穿刺，穿刺约培养基1/2深度。
本试验以鼠伤寒沙门氏菌、普通变形杆菌、小肠结肠炎耶尔森氏菌、福氏志贺氏菌为例进行试验。之后放置于25℃需氧培养24小时。

实验现象及原理解释：
培养结束后取出试管观察，发现接种鼠伤寒沙门氏菌、小肠结肠炎耶尔森氏菌的试管斜面及底层均为黄色，这是因为这两种细菌能发酵葡萄糖及山梨醇，产生大量酸，pH下降培养基变黄；
普通变形杆菌和福氏志贺氏菌斜面红色底层黄色是由于细菌仅能发酵葡萄糖，产生少量酸，斜面处的酸受空气氧化成碱性物质使pH较高显红色，底层酸不被氧化显黄色；
接种鼠伤寒沙门氏菌和普通变形杆菌的试管有气泡产生且变黑，是由于产硫化氢细菌可还原硫代硫酸钠、硫酸亚铁生成硫化氢，与培养基中亚铁离子反应生成黑色的硫化亚铁。