点击下载清晰视频

按照《GB 4789.41 食品安全国家标准 食品微生物学检验 肠杆菌科检验》标准，食品中肠杆菌科细菌的检验有两种方法。当样品中目标菌含量较高时，采用平板计数法，目标菌含量较低时，则采用MPN法进行检验计数。
1、样品处理
两种检验方法的样品处理和稀释，完全相同。都是取25g（mL）样品，加入225mL的BPW中，进行均质。然后取均质液进行10倍系列稀释。
2、分离
（1）平板计数法，是选择2-3个适宜连续稀释度的样品匀液，各取1mL分别加入无菌培养皿内，用VRBGA进行倾注后，36℃±1℃ 培养18 h～24 h，挑典型菌落划线至NA平板，培养后进一步鉴定。
（2）MPN法，是选择3个适宜连续稀释度的样品匀液，每个稀释度加入３管BPW试管中，共９管 ＢＰＷ，置于 于 36℃ ±1℃ 培养 18ｈ±2h。
然后，从每支试管中，分别吸取1mL增菌液，加入10mLEE肉汤管，EE肉汤管编号与BPW一一对应。36℃±1℃ 培养 24 h±2 h。
从每支EE肉汤管中分别取1环培养物，划线接种于VRBGA平板，36℃±1℃培养24 h±2 h，观察平板上有无典型菌落。挑典型菌落划线至NA平板，培养后进一步鉴定。
两种方法分离出的典型菌落，均不能直接进行计数，尚需进一步鉴定确认后，才能按相关方法进行计数。有关肠杆菌科细菌鉴定方法、结果判定和计数方法等内容，待后续视频讲解。
注意事项：
（1）MPN法中，每个试管都要有唯一编号，且编号与平皿上的编号一致，避免混淆。
（2）有关计数：VRBGA上的可疑菌必须经过进一步鉴定确认后，才能进行计数。