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明胶液化实验操作视频


明胶生化管
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什么是明胶?
明胶为从骨胶原而来的一种蛋白质,可溶于热水,形成的溶液凝固点在20-30℃,低温时呈固态状不流动,超过30℃时呈液体状。某些细菌具有明胶酶,可将明胶水解为多肽、氨基酸后失去凝胶性质,低温下不再凝固。
操作步骤:
可使用温水、培养箱或用手捂热等方法将明胶生化管温热至大约30-40℃,培养基呈液体流动状,摆直立,打开生化管,可用接种针或接种环挑取待测菌落穿刺接种或加入50-100μL的约109CFU/mL的菌悬液,缠上封口膜,置于36℃或其他适宜的条件下进行培养。
结果观察:
将生化管放入冰箱冷藏中10-20min或采用其他方法将培养基冷却至10℃左右,倾斜生化管,观察培养基是否能凝固。若培养基凝固不流动,说明明胶未被分解液化,为阴性反应;若培养基不能凝固呈液体状,说明明胶已被水解,为阳性反应。
注意事项:
(1)明胶在培养箱中和室温较高时呈液态状,因此观察试验结果时,必须确保培养基已完全冷却。
(2)细菌液化明胶的时间存在差异,有些细菌可在18-24h液化,有些细菌需要3-7天甚至更长时间才能液化,当出现阴性结果时,应至少观察一周。
(3)明胶的凝固点在28℃左右,受运输过程的温度及震荡影响,有可能出现培养基在管壁凝固形成不规则状,此为正常现象,并非质量问题,使用前可用水浴或培养箱或其他方法温育,使培养基呈液体流动状,摆直立即可。

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