霉菌和酵母菌显色培养基根据酶底物法,通过显色来区别不同霉菌和酵母菌,25-28℃培养3-5天后,白色念球菌显蓝绿色,热带念珠菌显蓝绿色,光滑念珠菌显蓝绿色,克柔假丝酵母显蓝绿色,酿酒酵母菌显蓝绿色,霉菌显棉状蓝绿色菌落,细菌被抑制。
成份(g/L):
蛋白胨 |
30.0 |
色素 |
1.8 |
氯霉素 |
0.1 |
琼脂 |
15.0 |
pH 6.0±0.2 25℃ |
此配方可以进行改良或增加营养成份以获得最佳的结果。
用法:
称取本品 9.5g(可按 4.75g/100ml 的比例扩大或缩小),加入 200ml 蒸馏水或纯化水中,加热溶解并不停搅拌,煮沸不要超过 1 分钟。将加热后的培养基水浴冷却至 45-50℃,轻轻地摇匀,倾入无菌平皿( 9cm 的 15ml/皿,7cm 的 10ml/皿),琼脂完全凝固后,在超净工作台中开盖次15 30分钟,去掉培养基表面水汽,备用。
操作步骤:
1、按国家标准、SN标准、FDA标准或其它方法制备样品液;
2、取样品液涂布或划线接种于平板上;
3、25-28℃ 培养 3-5 天,白色念球菌显蓝绿色,热带念珠菌显蓝绿色,光滑念珠菌显蓝绿色,克柔假丝酵母显蓝绿色,酿酒酵母菌显蓝绿色,霉菌显棉状蓝绿色菌落,细菌被抑制。
4、对可疑白色念珠菌菌落可划线接种到 PDA琼脂平板上,25-28℃ 培养 24-48 小时,挑取单菌落做镜检和生化试验。
质量控制
1、外观
此干燥培养基的粉末均匀,具有良好的流动性,呈乳白色。制备好的平板呈透明无色固体。
2、微生物试验
在 25-28℃培养 3-5 天:
质控菌株 | ATCC | 生长情况 | 菌落颜色 |
白色念珠菌 | CMCC98007 | +++ | 蓝绿色 |
热带念珠菌 | ATCC13803 | +++ | 蓝绿色 |
克柔氏假丝酵母菌 | ATCC14243 | +++ | 蓝绿色 |
光滑念珠菌 | ATCC15126 | +++ | 蓝绿色 |
酿酒酵母菌 | CMCC98002 | +++ | 蓝绿色 |
霉菌 | CMCC98003 | +++ | 棉状蓝绿色 |
大肠杆菌 | CMCC44568 | - | - |
方法的局限性
本培养基鉴定霉菌和酵母菌,少数情况下可能会出现假阳性或假阴性,需做其它补充试验。
典型特征
白色念珠菌典型特征为蓝绿色,热带念珠菌显蓝绿色,光滑念珠菌显蓝绿色,克柔假丝酵母显蓝绿色,酿酒酵母菌显蓝绿色,霉菌显棉状蓝绿色菌落,细菌被抑制。
贮存
制备好的平板应立即使用,应避免光线直接照射。干粉培养基应放置于阴暗干燥处, 保存温度 2-8℃,注意避光保存。
失效
干燥培养基超过保质期、结块和颜色变化都不能使用。
注意
此培养基仅供实验室使用。
参考文献
1.Mega et al (J. Biochem. vol. 71, pp 107-114, 1972).
2.Bendel et al. XP-002064132 "Distinct Mechanisms of Epithelial Adhesion for Candida albicans and Candida tropicalis" vol. 92, Oct. 1993, pp. 1840-1849.
3.Mira-Gutierrez et al., XP-002064133 "Identification of yeasts by hydrolysis of amides" Nov. 8, 1994, pp. 101-106.
Crist, Jr. et al., XP-002064134 "Comparison of the MUREX C. Albicans, Albicans/Sure, and Bacticard Candida Test Kits with the Germ Tube Test for Presumptive identification of Candida albicans" vol. 36, Jul. 5, 1996, pp. 2616-2618.
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霉菌和酵母菌显色培养基的微生物灵敏度试验:
按标签用法制备培养基,接种以下质控菌株,放置25-30℃需氧培养72-120小时。
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