一、培养基用途:
用于检测化妆品或其他物质(含有季铵化合物或防腐剂)的细菌总数。
二、培养基成分及使用方法:
1.培养基成分
成分 |
含量(g/L) |
牛肉浸粉 |
3.0 |
胰酪蛋白胨 |
5.0 |
吐温80 |
7.0 |
卵磷脂 |
1.0 |
葡萄糖 |
1.0 |
琼脂 |
15.0 |
pH 7.0±0.2 25℃ |
2.使用方法
称取本品32.0g,加热溶解于1000ml蒸馏水中。121℃高压灭菌15分钟,冷却至50℃左右时,倾入无菌平皿,备用。
三、原理:
胰酪蛋白胨和牛肉浸粉提供氮源和碳源;葡萄糖是可发酵的糖类;卵磷脂能中和季铵盐,吐温80可中和酚、六氯酚、福尔马林,两者结合可中和乙醇;琼脂是培养基的凝固剂。
四、实验结果:
1、按使用方法制备培养基,接种以下质控菌株,放置36±1℃需氧培养18-24小时。
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量(CFU) |
生长情况(回收率) |
其他特征 |
金黄色葡萄球菌 |
ATCC25923 |
20-200 |
≥70% |
/ |
大肠埃希氏菌 |
ATCC25922 |
20-200 |
≥70% |
/ |
伤寒沙门氏菌 |
ATCC14028 |
20-200 |
≥70% |
/ |
铜绿假单胞菌 |
CMCC10104 |
20-200 |
≥70% |
/ |
注:回收率计算参比培养基为TSA
2、伤寒沙门氏菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌在培养基中的生长情况如下图所示:
图1-1 Letheen琼脂微生物质控结果
a:伤寒沙门氏菌,b:铜绿假单胞菌,c:金黄色葡萄球菌,d:大肠埃希氏菌
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