去氧胆酸盐琼脂（DC）使用原理及方法

杨永帅
录入时间:2019-6-6 15:16:10 来源：青岛海博生物

一、实验原理：

用于大肠菌群的固体平板检测，其中蛋白胨提供氮源；乳糖提供碳源；去氧胆酸钠是一种抑菌剂，主要抑制革兰氏阳性菌的生长；磷酸氢二钾是一种缓冲体系；柠檬酸铁和柠檬酸钠是一种生长促进剂；中性红是一种指示剂，在酸性时呈红色，当大肠菌群发酵乳酸时产生酸性物质，所以菌落呈红色；氯化钠是维持细菌生长时的渗透压；琼脂是一种凝固剂。

二、试验方法：

称取本品43.0g，加入1000ml蒸馏水，加热溶解并不停搅拌，煮沸1分钟。冷却至45-50℃左右时，倾入无菌平皿，无需高压灭菌。使用前，把制备好的平板放置室温10-20分钟。

1、制备质控菌液。

2、选择合适稀释度的目标菌质控菌液0.1ml，均匀涂布于平板上，每一稀释度接种两个平板。

3、用1μL接种环取非目标菌质控菌液1环，将接种环接触容器边缘3次去除多余液体，在平板表面划六条平行直线，同时接种两个平板。

4、35℃倒置培养基培养24小时，记录实验结果。

三、结果判定：

质控菌株	菌株编号	接种量(CFU)	生长情况	回收率	其他特征
金黄色葡萄球菌	ATCC25923	/	G≤1	/	/
大肠埃希氏菌	ATCC25922	20-200	+++	≥70%	红色菌落
伤寒沙门氏菌	ATCC14028	20-200	+++	≥70%	无色透明菌落
弗氏柠檬酸盐杆菌	ATCC43864	20-200	+++	≥70%	红色菌落
阴沟肠杆菌	ATCC23355	20-200	+++	≥70%	红色菌落

图1-2 去氧胆酸盐琼脂微生物质控结果

备注：a:金黄色葡萄球菌，b:大肠埃希氏菌，c:伤寒沙门氏菌，d:弗氏柠檬酸盐杆菌，e:阴沟肠杆菌

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