一、试验原理:
液体硫乙醇酸盐培养基用于药品、生物制品的无菌检测,也可用于好氧菌和厌氧菌的检测。
酪胨在培养基中作为基础营养物质;酵母粉提供B族维生素;L-胱氨酸和硫乙醇酸钠均能使体系处于低氧化还原电势,有利于消除菌体生长代谢过程中产生的对自身有害的过氧化物质,此外L-胱氨酸的巯基(-SH)可以中和重金属的毒性,因此可以用于带有重金属物质的无菌检验;氯化钠维持菌体细胞生长所需的渗透压;刃天青作为氧化还原指示剂,该指示剂氧化态为粉红色,还原态为无色;琼脂可阻止二氧化碳、氧气扩散进入,从而造成厌氧环境。
二、培养基配方(g/L):
酪胨(胰酶水解)
15.0
酵母浸出粉
5.0
葡萄糖
5.0
硫乙醇酸钠
0.5
L-胱氨酸
0.5
氯化钠
2.5
刃天青
0.001
琼脂
0.75
pH值7.1±0.2(25℃)
三、试验方法:
称取本品29.25g,加热搅拌溶解于1000mL纯化水中,分装适宜容器,其装量与容器高度的比例应符合,培养结束后培养基氧化层(粉红色)不超过培养基深度的1/2。121℃高压灭菌15分钟迅速冷却。在供试品接种前,培养基氧化层高度不得超过培养基深度的1/5。否则,须经100℃水浴加热至粉红色消失(不得超过20分钟),迅速冷却,只限加热一次,并应防止被污染。
四、试验结果判断:
接种以下质控菌株,放置30-35℃需氧培养24-72小时。
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量(CFU) |
生长情况 |
其他特征 |
金黄色葡萄球菌 |
CMCC(B) 26003 |
10-100 |
+++ |
在试管中呈颗粒生长 |
铜绿假单胞菌 |
CMCC(B) 10104 |
10-100 |
+++ |
在试管表层生长,浑浊 |
枯草芽孢杆菌 |
CMCC(B) 63501 |
10-100 |
+++ |
在试管表层生长,浑浊 |
生孢梭菌 |
CMCC(B) 64941 |
10-100 |
+++ |
浑浊 |
产气荚膜梭菌 |
ATCC 13124 |
10-100 |
+++ |
在试管氧化层以下呈条状生长 |
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