一、用途:
用于霍乱弧菌分离培养。
二、实验原理:
蛋白胨、牛肉浸粉提供氮源、维生素和矿物质,氯化钠维持均衡的渗透压,牛胆盐抑制革兰氏阳性菌的生长;琼脂是培养基的凝固剂,偏碱性的pH有利于弧菌的生长,并能抑制部分杂菌的生长。
三、培养基配方(g/L):
蛋白胨 |
20.0 |
牛肉浸粉 |
5.0 |
氯化钠 |
5.0 |
牛胆盐 |
5.0 |
琼脂 |
12.0 |
PH 8.3-8.5 |
此配方可以进行改良或增加营养成分以获得最佳的结果
四、实验方法:
1、称取本品 47.0g,加热溶解于 1000ml 蒸馏水中,分装三角瓶,121℃高压灭菌 15min,备用。
2、制备质控菌液。
3、选择合适稀释度的目标菌质控菌液0.1ml,均匀涂布于待测平板以及参比平板上,每一稀释度接种两个平板。
4、36±1℃倒置培养基培养18-24小时,记录实验结果。
五、结果观察与解释:
接种以下质控菌株,在36±1℃下培养18-24小时:
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量(CFU) |
回收率 |
生长情况 |
其他特征 |
副溶血性弧菌 |
ATCC17802 |
10-100 |
≥70% |
+++ |
无色透明菌落 |
霍乱弧菌 |
/ |
10-100 |
≥70% |
+++ |
无色透明菌落,扁平湿润 |
六、方法的局限性
本培养基仅为细菌鉴定的一部分,需做其它补充实验。
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