DNA酶琼脂的原理及实验现象

  用途：用于细菌DNA酶检测。

  原理：胰蛋白胨和大豆胨提供碳源和氮源；有脱氧核糖核酸酶的细菌分解培养基中的脱氧核糖核酸(DNA)，使DNA长链水解成数个单核苷酸的寡核苷酸短链；氯化钙提供阳离子作为激活剂；氯化钠维持均衡的渗透压；琼脂是培养基的凝固剂。将盐酸滴在培养基表面，如DNA酶阳性，其菌落周围可以产生明显透明环，如DNA酶阴性，盐酸与完整的脱氧核糖核酸反应，可形成浑浊的沉淀；如果加入0.1%甲苯胺蓝溶液，甲苯胺蓝为指示剂，DNA酶阳性时，水解DNA部分为蔷薇色；DNA酶阴性时，甲苯胺蓝显蓝色。

  操作步骤：

  使用前，把制备好的平板放置室温10-20分钟。

  1、制备质控菌液。

  2、将质控菌液划线于平板上。

  3、36±1℃倒置培养基培养18-24小时，培养结束后滴加1N盐酸，记录实验结果。

  微生物试验：

  接种以下质控菌株，36±1℃倒置培养基培养18小时：

图1-1  DNA酶琼脂微生物质控结果

备注：a：金黄色葡萄球菌(ATCC25923)；b：金黄色葡萄球菌(ATCC6538)；c：大肠埃希氏菌

  方法的局限性

  本培养基仅为细菌鉴定的一部分，需做其他补充试验。

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