赖氨酸铁琼脂（LIA）原理及现象

一、用途

 用于同时检测肠杆菌科细菌的赖氨酸脱羧酶和产硫化氢试验,特别用于检测沙门氏菌和亚利桑那菌。

二、成分（g/L）及原理

    蛋白胨............................5.0
    葡萄糖............................1.0
    酵母浸粉..........................3.0
    L-赖氨酸盐酸盐....................10.0
    硫代硫酸钠........................0.04
    柠檬酸铁铵........................0.5
    溴甲酚紫..........................0.02
    琼脂..............................12.5
    pH6.7±0.2 at 25℃

 培养基中的蛋白胨和酵母浸粉提供基本营养物质，葡萄糖为唯一可发酵碳源，硫代硫酸钠可用于检测硫化氢的生成，溴甲酚紫为酸碱指示剂。若细菌仅能发酵葡萄糖，则产酸使培养基变黄，斜面由于产酸较少被氧化生成碱性物质，底层不被氧化，因此斜面显紫色底层显黄色。有些细菌具有赖氨酸脱羧酶，使赖氨酸脱羧产碱，底层又变成紫色。有些细菌可还原硫代硫酸钠产生硫化氢，并与柠檬酸铁铵反应生成黑色沉淀。

三、试验方法

  1、称取本品32.0g，加热搅拌溶解于1000mL蒸馏水中，分装试管，121℃高压灭菌15min，冷至60℃左右时，制成斜面。

  2、将质控菌株划线后穿刺接种到培养基上。

  3、放置于35±1℃恒温培养箱中需氧培养24±2小时。

四、结果观察

  接种以下质控菌株，放置于35±1℃恒温培养箱中需氧培养24±2小时。

图1 赖氨酸铁琼脂（LIA）培养基微生物质控结果

五、与三糖铁琼脂（TSI）对比

 三糖铁琼脂（TSI）和赖氨酸铁琼脂（LIA）均用于沙门氏菌的检测。TSI中除葡萄糖，还含有乳糖和蔗糖，绝大多数沙门氏菌不发酵乳糖和蔗糖，产硫化氢，因而在TSI上呈斜面红色，底层黄色，有黑色沉淀。而亚利桑那沙门氏菌中部分菌株可以发酵乳糖，在TSI上呈现出斜面黄色，底层黄色，产硫化氢，这一现象与普通变形杆菌相同（普通变形杆菌发酵蔗糖不发酵乳糖，产硫化氢）。奇异变形杆菌（发酵葡萄糖，不发酵乳糖和蔗糖，产硫化氢）在TSI上呈斜面红色，底层黄色，并有黑色沉淀，与多数沙门氏菌现象一致。因此，在TSI上很难将变形杆菌与沙门氏菌区分开。在LIA上，多数沙门氏菌（包括亚利桑那沙门氏菌）由于赖氨酸脱羧酶阳性，产硫化氢，因而表现出斜面紫色、底层紫色，底层有黑色沉淀。而变形杆菌不能将赖氨酸脱羧产碱，因而表现出斜面紫色，底层黄色，底层有黑色沉淀。与TSI相比，LIA能将沙门氏菌与变形杆菌区分开来，特别是有利于亚利桑那沙门氏菌的检测。

图2 LIA与TSI斜面上沙门氏菌和变形杆菌的对比

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