TSN琼脂原理及现象

用途：用于产气荚膜梭菌的平板计数。

原理：胰蛋白胨和酵母浸粉碳源，氮源、维生素和生长因子；多粘菌素B和硫酸新生霉素可抑制革兰氏阴性菌，一定浓度的硫酸新生霉素可抑制其他梭状芽孢杆菌的生长，且产气荚膜梭菌最适宜在46℃下进行培养；亚硫酸钠和柠檬酸铁铵用于检测硫化氢的产生，使菌落中心呈黑色；琼脂是培养基的凝固剂。

操作步骤：

1、制备质控菌液。

2、吸取合适稀释度质控菌液1ml加入无菌平皿内，每个稀释度做连个平行。每个平皿倾注冷却至50℃的TSN琼脂15ml，缓慢旋转平皿，使质控菌液和培养基充分混匀。上述琼脂平板凝固后，再加入10ml冷却至50℃的TSN琼脂均匀覆盖平板表层。

3、待琼脂凝固后，正置于厌氧培养装置内46℃厌氧培养不超过18小时，记录实验结果。典型的产气荚膜梭菌在TSN琼脂平板上为黑色菌落。

微生物试验：

接种以下质控菌株，正置于厌氧培养装置内46℃厌氧培养不超过18小时：

方法的局限性：本培养基仅为细菌鉴定的一部分，需做其他补充试验。

TSN琼脂微生物质控结果

a:产气荚膜梭菌，b:大肠埃希氏菌，c:铜绿假单胞菌

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