冷冻干燥保藏法

  冷冻真空干燥保藏法又称冷冻干燥保藏法，简称冻干法。它通常是用保护剂制备拟保藏菌种的细胞悬液或孢子悬液于安瓿（ānbù ）管中，再在低温下快速将含菌样冻结，并减压抽真空，使水升华将样品脱水干燥，形成完全干燥的固体菌块。并在真空条件下立即融封，造成无氧真空环境，最后置于低温下，使微生物处于休眠状态，而得以长期保藏。常用的保护剂有脱脂牛奶、血清、淀粉、葡聚糖等高分子物质。

  由于此法同时具备低温、干燥、缺氧的菌种保藏条件，因此保藏期长，一般达5～15年，存活率高，变异率低，是目前被广泛采用的一种较理想的保藏方法。

恢复培养冷冻干燥菌种的方法

一、安瓶管开封

1．用浸过75％酒精的脱脂棉擦净安瓿管。

2．用火焰将安瓿管顶端适度加热。

3．滴无菌水至加热的安瓿管顶端使玻璃开裂。

4．用挫刀或镊子敲下已开裂的安瓿管的顶端。

二、菌株恢复培养

1．用无菌吸管，吸取0.3～0.5ml适宜的液体培养基，滴人安瓿管内，轻轻振荡，使冻于菌体溶解呈悬浮状。

2．取0.1～0.2ml菌体悬浮液，移植于适宜的琼脂斜面／平板培养基上，剩余的菌液，注入适宜的液体培养基内，然后在建议的温度下培养。

3．若未能活化，或活化后有疑问时，请于收到菌种1个月内，通知营养与食品安全所，联系补寄事宜。

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