低温诱导霉菌分生孢子同步生长实验

  使培养液中微生物的生理状态比较一致，生长发育处在同一阶段的培养方法称同步培养法。同步培养的方法很多，最常用的有选择法和诱导法两种。
(一）选择法

  选择法是通过过滤、密度梯度离心、膜吸附和直接选择等方法，从细胞群体中选择处于同一生长发育阶段的细胞来进行培养的方法。 

1、离心沉降分离法  处于不同生长阶段的细胞’其个体大小不同，通过离心就可在一定程度分开，然后用同样大小的细胞进行培养便可获得同步培养。

2过滤分离法  用孔径不同的微孔滤膜可将大小不同的细胞分开，刚分裂的幼龄菌体较小，能通过滤孔，其余菌体留在滤膜上面，将滤液中的幼龄细胞进行培养，就可得到同步培养物。

3.硝酸纤维素薄膜法  先将菌液通过硝酸纤维素薄膜，由于细菌与滤膜带有不同电荷，所以细菌能吸附于膜上，翻转薄膜，再用新鲜培养液滤过培养，附着于膜上的细菌分离后的子细胞由于不与薄膜直接接触，及菌体本身的重量，加之附着着培养物液的重量，便下落到收集器内，短时间内用收集内的细菌接种培养，便可得到同步培养物。

选择法同步培养是在不影响曲体代谢下获得的，因而菌体的生命活动较为正常，但也有其缺点，一些微生物即使个体大小相同时，其发育阶段也可能不完全一致，这样的微生物不宜采用这种方法。
(二）诱导法

  诱导法主要是通过控制环境条件如温度、营养物质等来诱导同步生长。
1.温度调整法  将微生物的培养温度控制在亚适温度一段时间，使其缓慢地进行代谢，但又不进行分裂。然后将培养温度提高到最适生长温度，大多数细胞就会同步分裂。
2.营养条件调整法  控制营养物的浓度或组成以达到同步生长。限制碳源或其他营养物，使细胞只能进行一次分裂而不能继续生长，从而获得刚分裂的细胞群体，然后再转入适宜的培养基屮.它们便进入同步生长。

  诱导法除上述两种外还有其他方法，诱导法的缺点是会给细胞的正常代谢带来一些不利影响。

  材料

黑曲霉斜面菌种.麦芽汁平板4个

方法与步骤

1.孢子悬液的制备  取数环孢子放入盛有50ml无菌水的三角瓶中（瓶内放玻璃珠若干）

充分振荡，制成孢子悬液，孢子量约10⁵个/ml。

2.用镊子取圆形无菌玻璃纸1张（与培养皿直径大小相似），放在麦芽汁平板上。
3.取孢子悬液0.1ml放在上述平板上，用玻璃涂布器涂布均匀，置于冰箱（4℃）2h然后取出，放入30℃温箱培养1h。同时设一对照，不经低温处理直接放入30℃温箱培养11h。

4.镜检  计算孢厂出芽率，并比较菌丝生长情况。

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