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用1 mL无菌吸管或微量移液器吸取1:10样品匀液1.0 mL，沿管壁缓慢注于装有9 mL0.85％生理盐水的无菌试管中（注意吸管尖端不要触及稀释液），振摇试管或换用1支无菌吸管反复吹打使其混合均匀，制成1:100的样品匀液。
另取1 mL无菌吸管或微量移液器吸头，按上述操作顺序，做10倍递增样品匀液，如此每递增稀释一次，即换用1次1 mL灭菌吸管或吸头。
根据食品卫生标准要求或对检样污染情况的估计，选择三个连续的适宜稀释度，每个稀释度吸取0.1 mL稀释液于MRS琼脂平板或MC琼脂平板进行表面涂布，每个稀释度作两个平皿。MC琼脂平板用于嗜热链球菌的计数。含双歧杆菌的样品需绝对厌氧，置36 ℃±1 ℃恒温箱内培养48 h±2 h,不含双歧杆菌的样品需兼性厌氧，置36 ℃±1 ℃恒温箱内培养48 h±2 h,培养后选取菌落数在30～300之间的平板进行计数。乳酸菌在MRS和MC培养基上菌落生长形态特征。
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MRS琼脂
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MC琼脂
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乳杆菌属
(Lactobacillus)
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平皿底为黄色，菌落中等大小，凸起，微白色，湿润，边缘整齐，菌落呈圆形，直径为3.0 mm±1 mm。
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平皿底为粉红色，菌落较小，白色或淡粉色，边缘不太整齐，直径2.0 mm±1 mm,可有淡淡的晕。
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双歧杆菌属
(Bifidobacterium)
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兼性需氧培养条件下不生长。在绝对厌氧培养条件下，平皿底为黄色，菌落中等大小，瓷白色，边缘整齐光滑，菌落呈圆形，直径为2.0 mm±1 mm。
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兼性需氧培养条件下不生长。在绝对厌氧培养条件下，平皿底为粉红色，菌落较小，白色，边缘整齐，直径1.5 mm±1 mm,可有淡淡的晕。
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嗜热链球菌
(Streptococcus thermophilus)
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平皿底为黄色，菌落偏小，白色，湿润，边缘整齐，菌落呈圆形，直径为1.0 mm±1 mm。
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平皿底为粉红色，菌落中等偏小,边缘整齐光滑的红色菌落，直径2.0 mm±1 mm,可有淡淡的晕。
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