生化鉴定培养基质控和反应原理

细菌生化试验原理

      各种细菌所具有的酶系统不尽相同，对营养基质的分解能力也不一样，因而代谢产物或多或少地各有区别，可供鉴别细菌之用。用生化试验的方法检测细菌对各种基质的代谢作用及其代谢产物，从而鉴别细菌的种属，称之为细菌的生化反应。

糖发酵试验

  微生物能在有氧或无氧条件下代谢各种糖或醇能力，从而进行各种细菌的鉴别。

靛基质(吲哚)试验原理

 将被检菌接种到蛋白胨培养基中，36±1℃培养18h-24h后，沿试管壁滴加数滴吲哚试剂于培养物液面，观察结果。出现红色者为阳性，出现黄色

者为阴性。大肠杆菌能分解蛋白质中的色氨酸，产生靛基质(吲哚)，靛基质与对二甲基氨基苯甲醛结合，形成玫瑰色靛基质(红色化合物),为阳性结果。

赖氨酸脱酶试验

   将被检菌接种到赖氨酸脱羧酶肉汤和氨基酸脱羧酶对照生化管中，于36±1℃培养18h-24h后，观察结果。

赖氨酸脱羧酶肉汤和氨基酸脱羧酶对照均变黄为阴性，赖氨酸脱羧酶肉汤变紫，氨基酸脱羧酶对照变黄为阳性。

大肠杆菌赖氨酸试验为阴性，沙门氏菌为阳性。

细菌甲基红(Methylred)试验(该试验简称MR试验)  大肠杆菌等分解葡萄糖产生丙酮酸，丙酮酸再被分解，产生甲酸、乙酸、乳酸等，使培养基的pH降低到4.2以下，这时若加甲基红指示剂呈现红色。因甲基红指示剂变色范围是pH4．4(红色)～pH6.2(黄色)。产气杆菌，分解葡萄糖产生丙酮酸，但很快将丙酮酸脱羧，转化成醇等物，则培养基的pH仍在6.2以上，故此时加入甲基红指示剂，呈现黄色。

细菌VP试验原理

细菌在葡萄糖代谢中生成丙酮酸，从丙酮酸开始、随细菌种类不同而有多种分解途径，有的使丙酮酸进一步分解，生成甲酸、乙酸、乳酸、二氢和氧化碳等最终产物，有的可使丙酮酸脱羧变为中性最终产物乙酰甲基醇。在碱性条件下，可被空气中氧气氧化为丁二酮、丁二酮与蛋白胨中精氨酸所含的胍基起作用，生成红色化合物，即V-P试验阳性。

试剂组成：A液：a-萘酚  B液：40%氢氧化钾溶液

试验时先加A液，再加B液，若加反可能会出现假阳性。

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