中文版  |   English  |   加入收藏  |   客服热线:400-0532-596
微生物技术资料
文章检索
  首页 > 微生物知识->微生物基本知识->果糖-6-磷酸盐磷酸酮酶(F6PPK)测定双歧杆菌

果糖-6-磷酸盐磷酸酮酶(F6PPK)测定双歧杆菌



录入时间:2014-7-31 11:49:25 来源:海博生物

试剂

(1)0.05mol/L磷酸盐缓冲液pH6.5+500mg/L半胱氨酸-HCl。

(2)6mg/mLNaF+10mg/mL碘乙酸钠或钾

(3)果糖-6-磷酸盐(钠盐,70%-98%纯度)80mg/mL水溶液。

(4)盐酸羟胺(Hydroxy Lamine-HCl) 139mg/mL水溶液,使用时以NaOH中和至pH6.5。

(5)15g/100mL 三氯乙酸(TCA) 水溶液。

(6)4mol/L HCl。

(7)0.5 g/100mL FeCl3·6H2O溶于0.1mol/L HCl中。

 

1、挑取BBL琼脂上纯培养的双歧杆菌接种到TPY液体培养基, 绝对厌氧,36±1℃ 培养72h±3h。从10mL TPY培养液于3000r/min离心5min,弃上清液,细胞用上述试剂(1)洗涤2次,然后悬浮于1.0mL试剂(1)中。将盛有细胞悬液的容器置于一冰浴内,用超声波处理20min,以破碎细胞。然后在超声波处理物中加入试剂(2)和试剂(3)各0.25mL,置于37℃保温30 min。保温后在溶液中入1.5mL试剂(4),置室温5 min。加入试剂(5)和试剂(6)各1mL,置室温5 min。然后加入1mL试剂(7)观察溶液颜色。

2、结果判定:经以上程序测定如显红褐色或红紫色,则果糖-6-磷酸盐磷酸酮酶为阳性,否则为阴性。

 

 


 

上一篇:双歧杆菌的稀释步骤

下一篇:增加大肠菌群和大肠杆菌平板计数法的依据

相关文章:
环丝氨酸-头孢西丁-果糖(CCFA)琼脂培养基 食果糖乳杆菌
首页 | 关于我们 | 网上商城 | 在线客服 | 联系我们
业务联系电话
   400-0532-596 0532-66087773
   0532-66087762 0532-81935169
邮箱:qdhbywg@vip.126.com
地址:青岛市城阳区锦汇路1号A2栋
产品技术咨询
  工作日(周一至周六8:00-18:00):
  18562658263 13176865511
  其它时段:13105190021
投诉与建议:13105190021 13006536294