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单增李斯特菌MR-VP试验与鉴定-溶血实验



录入时间:2014-7-2 11:49:15 来源:海博生物

甲基红(MR)试验:将TSA-YE上培养物接种于缓冲葡萄糖蛋白胨水中,于37℃培养2-5d。滴加甲基红试剂一滴,立即观察结果。鲜红色为阳性,黄色为阴性。

V-P试验:将TSA-YE上培养物接种于缓冲葡萄糖蛋白胨水中,于37℃培养2-5d。加入6%α-萘酚-乙醇溶液0.5mL和40%氢氧化钾溶液0.2mL,充分振摇试管,观察结果。阳性反应立刻或于数分钟内出现红色,如为阴性,应放在37℃培养4h再进行观察。

李斯特氏菌MR-VP实验呈阳性。

将7%羊血琼脂平板底面划分为20-25个小格,从TSA-YE上挑取菌落刺种到血平板上,每格刺种一个菌落,并刺种阳性对照菌(单增李斯特氏菌和绵羊李斯特氏菌)和阴性对照菌(英诺克李斯特氏菌),于35℃培养24-48小时,穿刺时尽量接近底部,但不要触到底面,同时避免琼脂破裂。 于明亮处观察洁净的血琼脂平板,单增李斯特氏菌和斯氏李斯特氏菌在刺种点周围产生狭小的透明溶血环,英诺克李斯特氏菌无溶血环,伊氏李斯特氏菌产生大的透明溶血环。注意:不要据此来区别李斯特氏各种菌,仅仅是一种溶血现象。用CAMP试验来确证李斯特氏各种菌。

 


 

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