培养基的灭菌

概述

应采用湿热和过滤灭菌。

亮绿等特定培养基中含有对光和热敏感的物质只能煮沸灭菌。煮沸后应迅速冷却，避光保存

明胶、血清、糖类等不耐热高温物质，应采用高压锅低温灭菌法/间歇灭菌法灭菌。

有些试剂不需要灭菌，可直接使用。

湿热灭菌

高压锅或制备培养基中进行

高压湿热灭菌一般采用121 ℃灭菌15分钟。

当体积超过1000 mL时（容易导致过度加热），对灭菌条件进行适当调整，但应按照标准或使用说明的规定进行。

灭菌过程应有效果监测（特定位置的热电偶或测试条）

加热后采用适当的冷却方法，防止加热过度，对肠道菌培养基和大容器中的培养基十分重要

过滤灭菌

可在真空负压或正压的条件下进行。

滤膜或滤垫孔径0.22 um。

滤膜或滤垫使用前应灭菌。滤器于121℃灭菌15分钟，灭菌后在无菌条件下组装。

注意滤膜上附着有蛋白质（如抗生素）。使用时先将滤膜用无菌水润湿。

监测

pH、色泽、灭菌效果和均匀度等指标进行监测

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