(1) 观察染色的干玻片时经常遇到的问题大多是因对前期的染色不够细心所造成 的。操作时应使用适当浓度的细菌悬液，在载玻片上涂一层薄的均匀的细菌涂坛。如果 涂层太厚或密度分布不均匀，很难观察和得出结果。革兰氏染色的脱色和复染操作少骤 也要特别小心，
(2) 如果目镜前端较脏，会使影像的清晰度和对比度受到影响，好像是透过一层薄物 观察细菌。这多是由于使用油镜后没及时将油擦下净，镜油逐渐在镜头表面硬化造成 的。这时需要用镜头纸沾上二甲苯将其除去。但要注意不能经常使用二甲苯，否则会降 低镜头密封胶的作用。镜油如果长期不擦，会渗透到镜头里面污染物镜，这时，惟一的解 决办法只能是更换目镜。
(3)目镜和聚光镜上有污垢时，会有微粒出现在视野中。只需在观察玻片时旋转目 镜就能证明目镜是否干净。而当聚光镜上有污垢时，调节焦距，污点会变得清晰或模糊。用镜头纸小心除去这些污诟和尘土。有时尘污会堆枳到目镜内部的镜片表面，但目镜相 对较容易装卸,可以用吹吸球(从照相器材店购买)吹掉镜筒中的尘土。
(4) 有时，还需要检查物镜，看其是否能够正确定位。
(5) 所使用的载玻片和盖玻片的厚度要合适(可查阅显微镜生产厂的仪器说明书）c
(6) 如果视野不平衡或光线不够亮，检查聚光镜的配置是否正确。镜台下部聚光镜 有磨砂衬片,很容易放错。还要检查聚光镜和灯泡，确保其正常居中。
(7) 如果染色的玻片在10倍或40倍物镜下能够聚焦,但当使用90倍或100倍物镜 时不能聚焦，检查载物台上的玻片是否放颠倒。
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