实验：酵母菌形态观察

实验目的 

    认识酵母菌的形态结构，掌握其观察方法。 

实验内容 

1．酵母菌菌落特征的观察 

2．酵母菌细胞形态及芽殖方式 

3．液泡的活体染色观察 

4．肝糖粒染色观察 

5．脂肪粒染色观察 

实验原理 

    酵母菌是单细胞真菌，通常呈圆形、椭圆形或卵圆形，其菌落较大而厚，湿润，较光滑，颜色多为乳白、灰黄、淡黄、灰褐色，少见粉红或红色，偶见黑色。酵母菌个体比细菌大几倍到十几倍， 

在高倍镜下即能观察清楚。细胞内常有明显的细胞核及其内含物。无性繁殖以芽殖为主，在细胞的一端初生小突起如芽，逐渐增大，芽缢裂而与母细胞分离，形成独立的菌体。发生的芽如不立即脱离母细胞并继续出芽，则多数芽细胞集聚成芽簇。在陈旧培养中，芽簇细胞伸长成丝状，称假菌丝。

酵母菌的有性生殖形成子囊袍子，其过程由两个菌休细胞结合后，其中配合的细胞核分裂，形成 2个、4个或 8个子囊孢子。 

实验器材 

酿酒酵母培养物 

显微镜、载玻片、盖玻片、接种针 

0.1％美蓝液、中性红染色液、碘液 

实验步骤 

1．菌落特征的观察 

    取少量酿酒酵母划线接种在土豆平板培养基上，28—30℃养 3—5d。用肉眼观察菌落特征，项目包括菌落表面湿润或干燥、有无光泽、隆起形状、边缘形状、大小、颜色等。 

2．酵母菌细胞形态及芽殖方式 

    在洁净载玻片上滴加一滴无菌水或 0.1%美蓝液一滴， 用接种环取酵母菌菌台少许与无菌水或美蓝液混匀，盖上盖玻片，即成为水浸片。用高倍镜观察酵母细胞形态及出芽情况。 

    染液不宜过多或过少，否则，在盖上盖玻片时，菌液会溢出或出现大量气泡而影响观察。盖玻片不宜平着放下，以免产生气泡影响观察 

3．液泡的活体染色观察 

    在洁净的载玻片上滴加一滴中性红染色液， 用接种环取少量酿洒酵母与染液混匀， 染色 4—5min后，盖上盖玻片在显微镜下观察。中性红是液泡的活体染色剂，当细胞处于生活状态时，液泡被染成红色，细胞质及核不着色；若细胞死亡，液泡染色消失，细胞质及核呈现弥散性红色。 

4．肝糖粒染色观察 

    用酿酒酵母涂片，自然干燥后滴加 1—2滴碘液，盖上盖玻片后在显微镜下观察。肝糖粒遇碘呈深红褐色。 

5．脂肪粒染色观察 

    加一小滴苏丹黑于洁净的载破片上，挑取少许酵母菌体与之混匀，盖上盖玻片后镜检。脂肪粒呈黑色。 

实验结果及讨论 

1．实验结果 

    绘图说明你所观察到的酵母菌的形态特征。 

2．讨论 

    针对实验原理、步骤、现象进行讨论。

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