细菌的鞭毛染色

许多细菌自细胞内长出一至许多根细丝状附属物称为鞭毛。鞭毛是细菌的运动器官，有鞭毛的细菌均可运动。鞭毛细长透明，其宽度在普通光学显微镜波长检验范围之外，所以不易观察。但是在不染色情况下可以检测到细菌的运动推断鞭毛的存在。
【实验目的】
学习并掌握鞭毛染色的原理和方法。
【实验原理】
细菌的鞭毛非常纤细，直径一般在20nm左右，用电镜才能观察。本实验采用特殊染色法，即在染色前先经媒染剂处理，媒染剂吸附在鞭毛上，使鞭毛加粗，便可达到普通光学显微镜的辨析范围以内。染色后，即可利用普通光学显微镜进行观察。
【实验材料、药品及器具】
1、菌种 培养18-24h的菌种
大肠杆菌（Escherichia coli）
普通变形杆菌（Proteus Vulgaris）
荧光极毛杆菌（Pseudomonas fluorescens）
2、染色液 鞭毛染色液甲
鞭毛染色液乙（实验前配好的新鲜染液）
3、器皿 显微镜、酒精灯、洗瓶装蒸馏水、香柏油、二甲苯、擦镜纸、吸水纸、干净载玻片、玻璃缸、无菌水三管、灭菌长滴管三支。
【实验步骤】
1、用长滴管取无菌水轻轻移入长好菌种的试管内，培育20-30min使细菌自己慢慢游入水中并充分舒展其鞭毛，使水呈轻度混浊。
2、取一滴菌悬液滴于玻片的1/3位置上，然后轻轻抬起此端，使悬液缓慢流至玻片另一端，平放使其在空气中自然干燥固定。切忌用火焰烘干。
3、在涂片部位滴甲液，染色3~5min。
4、用蒸馏水轻轻冲洗。
5、加乙液染30~60s，可在酒精灯上稍稍加热。冲洗多余的染液。
6、制片干后检查。
【实验结果】
1、显微镜下检查鞭毛染成什么颜色和形状。
2、比较菌种鞭毛着生的位置、数目并绘图。
【思考题】
１、菌种的培养时间与鞭毛染色有什么关系？
２、你在显微镜下看到的鞭毛是否为原来的大小和形状？
３、鞭毛涂片与芽孢涂片有何区别？为什么？

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