菌种保存及培养

 

一般用到大肠杆菌，金葡菌，黑曲霉，白色念珠球菌，生孢梭菌，枯草芽孢等，我们的目的是保藏一年，标准是买进时是第二、三代，使用时不超过第五代。

 

方法：普通冰箱0度一下冷藏。先把买回来的二代菌在相应的培养基中培养分离，观察菌落形态和做革兰氏染色，确定是我们所需要的菌后，再事先准备好半固体琼脂小管，接着用接种环挑取菌落穿刺接种于琼脂的斜面及高层，然后在覆盖上事先准备好的灭过菌并干燥过的液体石蜡，约1CM。就可以冷藏了，有效期一年。

 

一般是制备12支，然后要用时在取出一支活化后划线接种于琼脂斜面，培养24小时候，冷藏在冰箱里，有效期一月，这个制备4支。这样就能保证每周都有菌用了，使用时是第四代或第五代。

 

如果是第三代想用第四代的话，就可以把买回来的菌斜面跳过平板划线形态及革兰氏检查（正规渠道买的菌一般还是可靠的），直接做半固体穿刺接种以后用液体石蜡封起来后冷藏（多做几支）。使用时再活化后划线于营养琼脂斜面，培养24小时，这时就可以挑取菌落使用了（第四代），有效期一个月(这个斜面制备4支冷藏，那么就可以每周使用一支了)。也就是说石蜡管做了几支就可以用几个月，但最多是一年。