当环境温度不适应果蝇生长时(温度低于18℃) ,培养基接种后的7d内,特别容易长霉。
要避免长霉,应注意:
①培养果蝇的器皿要严格消毒。培养瓶洗干净后,自然凉干, 再与棉塞一道进行高温干燥灭菌(120℃, 30min) 。
②培养基营养要全面。果蝇培养基的种类很多,本实验室用的是玉米培养基,配方如下:水750mL煮开,加琼脂6. 2g,待琼脂溶解后加白糖62.5g,搅拌溶解后加调成糊状的玉米糊(玉米粉82. 5g,用冷水调成糊状) ,煮开2～3min,加酵母粉7g,加热1～2min,搅拌均匀后,移去火源,加丙酸2mL (起杀菌防霉的作用) 。培养基稍稍冷却后,倒入已灭菌的培养基瓶中,尽量不要让培养基粘在瓶壁上,塞好棉塞,放入仍有余热的干燥箱中将瓶壁上的水蒸干。
③接种时消好毒。在无菌室内接种, 如没有无菌室, 在接种前用75%酒精棉球擦双手一遍。接种后,放入适宜果蝇生长温度的培养箱中培养果蝇(温度20～25℃) ,一旦下一代成蝇孵出来后,培养基就不易长霉。
长霉后的处理方法
若培养基长霉后,由于霉菌孢子漂浮于培养瓶的整个空间,包括果蝇身上,如将此果蝇接种到新的培养基中,大约经过4 ～5d,培养基将会重新长出霉菌来,遇到该问题,解决的方法只有两种:一是不再接种这种长霉菌果蝇,重新接种未长霉的果蝇;二是采取措施杀死果蝇身上的霉菌孢子。
杀霉菌方法为:将带有霉菌孢子的成蝇倒入空培养瓶中,棉塞上倒适量的75%酒精,再将瓶口塞紧,利用酒精具有挥发性,挥发后的酒精充满整个瓶内,从而将果蝇身上的霉孢子杀死。
在操作上应注意两点:一是倒在棉塞上的酒精量要合适,过多果蝇易醉昏,过少杀死不了霉菌孢子;二是果蝇呆在空瓶内的时间要恰当,以2d为好。
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