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志贺氏菌属检验的标准操作程序



录入时间:2011-5-11 10:17:18 来源:互联网

目的
    指导检验伤寒、副伤寒沙门氏菌。
该SOP变动程序
    本标准操作程序的改动,可由任一使用本SOP的工作人员提出,并报经下述人员批准签字:专业主管、科主任。
【标本的采集】
    由受检者将采便用已蘸有甘油盐水的棉棒自行插入肛门内,轻轻转动,然后取出,插入带有编号的塑料试管中,交给检验科人员。
【检验程序】
    采便→立即划线接种SS平板→培养后挑取可疑菌落接种三糖铁斜面及半固体培养基→生化学试验→血清学试验→报告检验结果。
【操作步骤】
    1.      分离培养
采便后立即用采便棒划线接种SS琼脂平板。36±1℃培养18-24小时,挑取无色半透明的光滑菌落分解乳糖或迟缓分解乳糖的光滑菌落,接种三糖铁斜面及半固体,36±1℃培养18-24小时。
     2.      生化学试验
凡是三糖铁反应符合志贺氏菌属特征者(斜面产碱或不变色,底层产酸,H2S(—),产气(—),但福氏6型产生少量气体)、无动力、革兰氏阴性杆菌、作V-P试验,苯丙氨酸,赖氨酸,柠檬酸盐,葡萄糖铵试验。其结果全部阴性者,作血清学试验。
    3.      血清学试验
挑取三糖铁斜面上的培养物
    福氏菌的鉴定:凡是与福氏多价血清凝集的菌株,可先用3、4,群6,群7,三种因子血清检查,根据群因子血清反应结果,再用型因子血清检查。福氏菌抗原成分如下
 
    福氏志贺氏各菌型与五型抗原成份
型抗原
群抗原
在群因子血清中的凝集反应
3、4
6
7、8
a
I
1,2,4,5,9………
+
-
-
b
I
1,2,4,5,6,9……
+
+
-
2a
1,3,4………
+
-
-
2b
1,7,8,9……
-
-
+
3a
1(3,4),6,7,8,9…
(+)
+
+
3b
1,(3,4),6……
(+)
+
-
4a
1,3,4………
+
-
-
4b
1,3,4,6………
+
+
-
5a
1,3,4………
+
-
-
5b
1,5,7,9………
-
-
+
6
1,2,(4)………
(+)
-
-
变种
1,7,8,9………
-
-
+
变种
1,3,4………
+
-
-
( )内的抗原可能不存在。
    4.      菌型的判定和结果的报告 
    根据生化学试验和血清学分型试验结果,判定菌型,报告结果。
【质量控制要求】
   1.      增菌及分离必须保证一个一支增菌管,一块平板,禁止多人一管,多人一块平板。
   2.      分离平板时平板一半以上应有孤立菌落,以供挑选。

 

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