口蹄疫病毒检验

口蹄疫病毒检验
 Foot-and-mouth disease virus，FMDV

口蹄疫病毒(Food and mouth disease virus，FMDV)是牛、猪、羊等偶蹄动物口蹄疫的病原。

FMD：OIE  A类传染病之一，是全球性最重要的动物健康问题之一。1898年，德国科学家Loeffler与Frosch：口蹄疫病畜的病料通过滤菌器后→仍能使健康动物发病。

 

一、生物学特性

口蹄疫病毒属于：微RNA病毒科(Picornaviridae)口蹄疫病毒属(Aphthovirus)，属内只有口蹄疫病毒一种。二十面体对称，直径20～25nm，无囊膜，病毒基因组为单股正链RNA，在RNA芯髓外对称衣壳上有32个壳粒。电镜下，可见病毒粒子表面的颗粒状结构和一个密度较低的中心。此外尚可见有较小的蛋白质亚单位颗粒，直径7～8nm，无感染性。病毒子在宿主细胞浆内可形成晶格状排列。本病毒是动物病毒中发现最早的一种。

 

二、抵抗力

对酸敏感，病毒在pH为6.5的缓冲液中、4℃条件下14h灭活90％，在pH5.5时1min灭活90％，在pH5.0时每秒钟灭活90％，pH3.0时瞬间灭活，病毒在pH7.0～7.5时十分稳定。病毒的感染性RNA在pH4.0时较原病毒稳定。口蹄疫病毒对碱也很敏感。对消毒剂的抵抗力较强。病毒在低温下能长期保存。病毒的灭活温度为85℃1min，70℃10min，60℃15min，但裸露的RNA对热较稳定。

 

三、抗原性

根据病毒的血清学特征，目前已知口蹄疫病毒有七个主型：A、O、 C、南非Ⅰ、南非Ⅱ、南非Ⅲ和亚洲Ⅰ型(SAT₁、SAT₂、SAT₃、Asia₁ )。各型之间没有相互免疫作用。

本病毒有较大的变异性，病毒在保存和流行中，常发生血清学的变异，有时流行初期与末期毒型不一致，几乎每年都有新的亚型出现，本病毒已发现85个以上的亚型。

 

四、培养特性

1．组织培养  利用犊牛、幼猪的肾脏或豚鼠、牛胚胎上皮组织制成细胞单层来培养病毒，病毒繁殖后，使细胞发生病变。

2．鸡胚培养  本病毒不易在鸡胚上生长，必须反复交替通过牛与鸡胚或在添有牛舌上皮的鸡胚组织培养继代后，才可能适应于鸡胚或鸡胚组织培养。

在感染了口蹄疫病毒的细胞培养液中，有大小不同的4种粒子：最大的粒子为完整病毒；第二种为不含RNA的空衣壳；第三种为衣壳蛋白亚单位；第四种是病毒感染相关抗原。

 

五、致病性

在自然条件下，主要发生于偶蹄兽，其中以奶牛和黄牛最易感，其次是水牛，牦牛、猪，再次为羊和骆驼等。野生偶蹄兽也能发生。从流行病学的观点来看，绵羊是本病的“储存器”，猪是“扩大器”，牛是“指示器”。

1.传播途径:呼吸道、消化道(被污染的饲料、饮水) ；创伤、皮肤、粘膜

2.流行特点：有一定的季节性(以冬、春季节发病较多，夏季可以平息),传播迅速,一般沿交通线进行传播

 

六、微生物学诊断

    (一)豚鼠接种试验  选择500g以上的健康豚鼠4～6只，剪去后肢足掌部被毛，用湿棉花球洗净，再用70％酒精棉消毒。将足掌部皮肤或口腔粘膜划破，把感染性病料涂擦于划破处。第二天如局部有水疱，即可确诊。

(二)乳鼠接种试验  选2～7日龄乳鼠5只，4只做检样，1只做对照，每只颈背部皮下接种0.1ml，观察1周，如有死鼠,及时取出，制备1:3检样，传代。如无死鼠取活鼠冻死传代，传2-3代不死亡为阴性。

FMDV接种乳鼠：呼吸急促，四肢和全身麻痹