大肠菌群MPN的其它检验方法

1. 疏水网膜法(hydrophobic  grid-membrane filter, HGMF)   加拿大的Sharp AN博士等(1974)首次报道。其基本原理是：以疏水物质在5cm2、孔径为0.45µm的滤膜上，横竖各刻印40条线，将滤膜分为1600个小格，以疏水线作为栅栏，防止菌落扩散。样品稀释液首先通过5µm的前滤器过滤，再通过0.45µm的HGMF滤膜过滤，然后根据所需检验菌的特性，将滤膜置于不同的选择培养基上培养24h～48h，阳性菌落即可通过显色而进行鉴定，如果是大肠菌群则呈蓝色。根据阳性菌落数查“阳性菌落数与单位生长最近似值换算表”即可得出单位样品中大肠菌群的MPN。

本法可在24h～30h得出结果，大肠菌群准确率为100%，无假阳性。

该法的优点在于：只使用单一的稀释度，大大减少了检验过程中的随机误差和系统误差；在过滤时除掉了所含的一些固体物质，及一些不利于细菌生长的可溶性物质，便于细菌的生长；因为滤膜先在营养琼脂上培养4h～5h，再转移到选择性培养基，使受伤细菌得以恢复，因此缩短了检出时间，提高了灵敏度。

2. TTC显色法   该法使用的是含有TTC(氯化三苯四氮唑)的乳糖发酵培养基，接种方法与常规法相同。接种后于35℃～37℃培养18h～24h，观察TTC乳糖培养基的显色和产气现象来判断大肠菌群，然后根据阳性管数，查大肠菌群MPN检索表，报告大肠菌群数。

3. DC半固体试管法   该法是将检样稀释成3个稀释度，分别接种于含有DC(去氧胆酸钠)的半固体培养基中，充分混合，待凝固后，放入37℃温箱内培养18～24h，根据培养基的颜色和有无气泡的产生或琼脂崩裂现象来判断大肠菌群，并根据阳性管数查MPN检索表报告大肠菌群数。