原理：当细菌利用铵盐作为唯一氮源，并利用枸橼酸盐作为唯一碳源时，可在枸橼酸盐培养基上生长，生成碳酸钠，并同时利用铵盐生成氢，使培养基呈碱性。
方法1：
Simmons氏培养基：
柠檬酸钠 lg
K2HPO4 lg
硫酸镁 0.2g
氯化钠 5g
琼脂（洗过） 20g
NH4H2PO4 1g
1％溴麝香草酚蓝酒精溶液 10ml
蒸馏水 加至1，000ml
调整pH至6.8，15磅15分钟高压灭菌后制成斜面。
将上述培养基中的琼脂省去，制成液体培养基，同样可以应用。将被检细菌少量接种到培养基中， 37℃培养2～4日，培养基变蓝色者为阳性，不变者为阴性。
方法2：
Christenten氏培养基：
柠檬酸钠 5g
KH2PO4 1g
葡萄糖 0.2g
氯化钠 5g
酚红 0.012g
半胱氨酸 0.1g
琼脂 15g
酵母浸膏 0.5g
蒸馏水加至 1000ml
有的配方尚加柠檬酸铁铵0.4g，硫代硫酸钠0.08g。
PH不必调整。高压灭菌后做成短厚的斜面。接种时先划线后穿刺，孵育于37℃观察七天。阳性者培养基变红色，阴性者培养基仍为黄色。
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