用全封闭薄膜过滤法进行控制菌的检查

【摘要】  目的  将智能集菌仪用于微生物限度检查中控制菌的检查 方法  用智能集菌仪的全封闭薄膜过滤系统检查氯霉素滴眼液中的金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌。结果  阳性对照呈阳性，阴性对照呈阴性，供试品澄清无菌生长。结论  该方法简便、准确，可用于微生物限度检查。

    【关键词】  全封闭薄膜过滤;控制菌;检查

    在微生物限度检查中，具有抑菌成分的药物控制菌的检查， 采用沉降法、离心沉淀法和薄膜过滤法， 些方法由于暴露于空气中时间过长而污染供试品，影响实验结果的可靠性。现将智能集菌仪用于控制菌的检查，不仅可避免上述缺点，还能提高检品的阳性检出率。

    1.1  仪器  HTY22000 集菌仪(杭州泰林医疗器械厂) ，HTY集菌培养器。 电热恒温培养箱。

    1.2  试剂  氯霉素滴眼液，0.9 %氯化钠注射液。胆盐乳糖增菌液、营养肉汤培养基、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌，均由中国生物制品检定所提供。

    2.1  金黄色葡萄球菌的检查　取氯霉素滴眼液10ml，加0.9 %氯化钠注射液90ml ，制成1:10 的供试液。取供试液20ml 置装有0.9%氯化钠注射液的灭菌具橡皮塞的瓶中，将双芯针头插入橡皮塞内，通过集菌仪定向蠕动加压作用使供试品中微生物被截留在集菌培养器的滤膜上。用0.9%氯化钠注射液500ml 冲洗滤膜，消除抑菌成分。然后将营养肉汤培养液通过进样管直接注入两 菌培养器中，其中1 瓶加入金黄色葡萄球菌1ml ，作阳性对照实验，同时用0.9%氯化钠注射液做阴性对照。并将培养器放置在电热恒温箱中，经37℃培养18～24h。观察并记录是否有菌生长。其中接种金黄色葡萄球菌的应在24h内有菌生长，阴性对照无菌生长。

    2.2  铜绿假单胞菌的检查  用胆盐乳糖增菌液，方法同2.1。

    氯霉素滴眼液经24h 培养后无菌生长，阳性对照呈阳性，阴性对照呈阴性。符合《中华人民共和国药典》2005 年版二部微生物限度检查中控制菌的规定。

    具有抑菌成分的供试品，用HTY22000集菌仪与HTY集菌培养器组成的全封闭检测系统进行控制菌的检查，具有简便、快速、准确、免受外源性污染的优点，避免用其他方法而出现繁琐的操作过程，确保了实验结果的准确可靠。此法不仅适用于溶液剂、合剂、滴眼剂等液体制剂，某些固体制剂、软膏剂以适当的溶剂溶解后，也可用此方法进行控制菌的检查，并能大大提高供试品的阳性检出率，使结果准确可靠。

作者：王淑杰，薛辉，于百青《中华医药杂志》