小肠结肠炎耶尔森氏菌检验(1)

小肠结肠炎耶尔森氏菌（Yersinia enterocolitica）广泛分布于自然界，是一种人畜共患的病原微生物，对人以肠道感染为主，并可成为各种疾病的病原。在食品和饮水等受到本菌污染时，往往可引起人的胃肠炎暴发，其症状表现与沙门氏菌食物中毒相似。检验以检出该菌为主，用生化和血清学进行鉴定。该菌生长的最适温度为22~29℃，但它可在0~4℃发育，为嗜冷性致病性细菌，因此，应特别引起注意的是，如被该菌污染的食品，虽在低温保存，但不能防止其生存和繁殖，这与其他肠道致病菌所不同。

为加强食品卫生管理，必须提高对该菌的检验技术，建立和完善检验方法，根据实际应用，对该菌检验在原国家标准方法中所发现的问题进行了试验研究后，对一些检验项目作了改进，提出了本修订方法，以代替原GB 4789.8－84。

 

 

一、检验方法

　

　　（一）操作步骤

　　1. 样品采集和处理：与沙门氏菌食物中毒采集和处理相同。

2. 增菌培养：将食品校品接种到改良磷酸盐缓冲液中，增菌液以1:10的比例混合，置4℃冰箱进行冷增菌。

3. 碱处理：取肉及其制品等的冷增菌液0.5mL与碱处理液4.5mL混合15s。

4. 分离培养：将冷增菌液和碱处理的冷增菌液分别接种CIN-I和改良y培养基，培养于26℃48h后，在CIN-I平板上挑取红色牛眼状菌落。在改良y培养基上挑取无色透明不粘稠的菌落，进行进一步鉴定。

5. 改良克氏双糖试验：将上述可疑菌落接种到改良克氏双糖管中，于26℃、24h培养，将斜面和底部皆变黄者做进一步生化鉴定。

6. 尿素酶试验和动力观察：将改良克氏双糖上的可疑培养物接种到尿素培养基上，注意接种量要大，挑取一接种环，振摇数秒钟，放置26℃培养2~4h，然后将阳性者接种两管半固体，分别放26℃和37℃温箱，培养24h检查，如在26℃有动力者，可进行镜检和进一步生化试验。

7. 染色镜检：将上述可疑菌落做涂片染色，进行显微镜观察，呈革兰氏阴性球杆菌，有时呈椭圆或杆状，大小为0.8~3.0μm×0.8μm者做进一步生化检验。

8. 生化试验：将上述可疑菌落做下列主要生化试验与其他相似细菌进行鉴别。

V-P试验、鸟氨酸脱羧酶试验，山梨醇、甘露醇、蔗糖、棉子糖、鼠李糖等发酵试验。

所有以上生化反应皆为26℃培养。

9. 血清学鉴定：除进行生化学鉴定外，亦可做血清型别的鉴定。目前国内可生产27种O型血清因子，供各地使用，具体操作方法与沙门氏菌O因子血清分型相同。