中药提取组合物(胶囊)对念珠菌及曲霉的体外抗菌实验

【摘要】  目的探讨中药提取组合物(桂皮油、藿香油)胶囊对致病性念珠菌、曲霉的体外抗菌活性。方法应用试管药基法，测定中药提取组合物胶囊对念珠菌(白念、热带、克柔氏)曲霉(烟曲、黄曲)的最小抑菌浓度(MIC)。结果中药提取组合物MIC范围为白念珠菌(桂皮油0.06～0.52 mg/ml、藿香油0.03～0.26 mg/ml)、热带念珠菌(桂皮油0.13～1.03 mg/ml、藿香油0.06～0.52 mg/ml)、克柔氏念珠菌(桂皮油0.13～0.52 mg/ml、藿香油0.06～0.26 mg/ml)、烟曲霉(桂皮油0.13～0.52 mg/ml、藿香油0.06～0.26 mg/ml)、黄曲霉(桂皮油0.26～0.52 mg/ml、藿香油0.13～0.26 mg/ml)。结论中药提取组合物胶囊对致病性念珠菌(白念、热带、克柔氏)曲霉(烟曲、黄曲)体外均有很强的抗菌活性，为开发中药治疗侵袭性真菌病提供理论依据。

【关键词】  桂皮油; 藿香油; 念珠菌; 曲霉; 体外抗菌实验

近年来，原发性或继发性深部真菌感染发病率迅速上升，尤其是一些严重性消耗性疾病如恶性肿瘤、血液病、肺部感染、实体器官移植等是其死亡的主要因素之一。由于现今临床使用的药物多系化学合成如氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑、卡泊芬净、两性霉素等，虽然治疗深部真菌感染发挥着重要的作用，但长期使用这类药物，副作用较大，价格昂贵，因此，寻找和开发抗致病性深部真菌的中药制剂，是祖国医药研究的方向。为此，对中药提取组合物胶囊进行体外抗真菌活性实验，为治疗深部真菌感染提供理论基础。

　　1 材料

　　1.1 药物来源香桂胶囊由河北医科大学制药厂研制，批号0801-03，其内含物由中药提取物(桂皮油、藿香油)组成。氟康唑胶囊由德国辉瑞制药有限公司提供，批号7073402。

　　1.2 菌种临床分离株来自河北医科大学第二医院皮肤科真菌室，均为致病性深部真菌(痰标本直接镜检可见大量菌丝及芽生孢子，培养有念珠菌生长，经鉴定为白念珠菌、热带念珠菌、克柔氏念珠菌。菌丝呈45℃角分枝状，培养鉴定为烟曲霉、黄曲霉)。标准菌株从中国医学科学院微生物所购买。临床株白念珠菌(30株)、热带念珠菌(20株)、克柔氏念珠菌(10株)。标准株白念珠菌(2株)、热带念珠菌(2株)、克柔氏念珠菌(2株)、烟曲霉(2株)、黄曲霉(2株)。

　　2 方法

　　2.1 药基配制采用试管内药基法，先将中药组合物胶囊内含物用5倍生理盐水在研钵内研20 min，再与高压灭菌后的葡萄糖蛋白胨琼脂基趁热(液态)充分混合，倍比稀释成A(桂皮油2.06 mg/ml、藿香油1.03 mg/ml)、B(桂皮油1.03 mg/ml、藿香油0.55 mg/ml)、C(桂皮油0.515 mg/ml、藿香油0.257 mg/ml)、D(桂皮油0.257 mg/ml、藿香油0.129 mg/ml)、E(桂皮油0.129 mg/ml、藿香油0.064 mg/ml)、F(桂皮油0.064 mg/ml、藿香油0.032 mg/ml)、G(桂皮油0.032 mg/ml、藿香油0.016 mg/ml)。氟康唑同上配制成A(2.06 mg/ml)、B(1.03 mg/ml)、C(0.515 mg/ml)、D(0.257 mg/ml)、E(0.129 mg/ml)、F(0.064 mg/ml)、G(0.032 mg/ml)的浓度，分装试管，置斜面。

　　2.2 菌种接种挑取适量菌株与生理盐水混合，丝状真菌置于研磨器中与生理盐水混合研磨，使每毫升菌悬液含1×105-6菌细胞，每个试管内接种50 μl菌悬液，每个浓度接种2管，同时用葡萄糖蛋白胨琼脂基作对照。置36℃恒温箱内，每日观察生长情况，分别于1，2，3周做记录，3周后最大稀释度无菌落生长为最小抑菌浓度(MIC)。结果见表1。　表1 中药提取物胶囊-氟康唑对念珠菌、曲霉MIC

　3 结果

　　中药组合物体外抗真菌活性实验结果：对致病性白念珠菌、热带念珠菌、克柔氏念珠菌、烟曲霉、黄曲霉均有较强的抗菌作用，对白念珠菌抗菌作用最强。对氟康唑耐药菌株克柔氏念珠菌、烟曲霉、黄曲霉也有很好的抗菌作用。

　　4 讨论

　　中药组合物(胶囊)由桂皮油和藿香油组成，桂皮油是肉桂的挥发油，其化学成分为肉桂醛(cinnamalbehyde)，藿香油主要成分是藿香醇。文献报道[1～4]，两种挥发油对多种真菌有抗菌作用。本实验将桂皮油和藿香油组合在一起，桂皮油对念珠菌(白念珠菌、热带念珠菌、克柔氏念珠菌)，MIC90 0.06～0.13 mg/ml，藿香油为0.03～0.06 mg/ml，均有很强的抗菌活性，对克柔氏念珠菌的抗菌活性优于氟康唑，对烟曲菌和黄曲菌桂皮油MIC90为0.26 mg/ml，藿香油为0.06～0.13 mg/ml，均显示较强的抗菌活性，而氟康唑对烟曲菌、黄曲菌、克柔氏念珠菌均耐药。

由于近年来侵袭性真菌感染(IFI)的发病率逐渐增多，特别是血液系统恶性疾病和和器官移植患者的发病和死亡病例均有明显增加，这严重危害人类的健康。中药组合物研制成胶囊制剂，进行体外抗真菌活性实验，对常见致病性白念珠菌、热带念珠菌、克柔氏念珠菌和烟曲菌、黄曲菌有显著的抗菌活性，为中药口服制剂，治疗深部真菌感染提供了理论依据。鉴于中药组合物(胶囊)抗真菌活性较强，毒性低、药源充足、价格低廉，作者认为，该药有很好的应用前景，应进一步研究、开发和推广。

作者：王刚生， 邓洁华  《时珍国医国药》

【参考文献】
  　[1] 杨得坡，Chaumont Jean-Pieerre，Millet Jolle. 藿香和广藿香挥发油对皮肤癣菌和条件致病真菌的抑制作用[J].中国药学杂志，2000，1：9.
　　[2] 白文杰.桂醛试管内抗某些致病性真菌实验观察[J].中华皮肤科杂志,1988,21(6):380.
　　[3] 张文娟.肉桂醛抗条件致病性真菌作用的观察[J].临床皮肤科杂志,1995,24(4)：219.
　　[4] 吴慧清，吴清平，石立三，等.植物精油对微生物的抑菌效果评估研究[J].食品研究，2008,29(12)：83.

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