按上海市卫生局规定，医院自制制剂均应进行微生物限度检查。我们对本院的自制制剂逐一 进行检查，在实验中，溶液剂较易进行，而半固体制剂，特别是油包水型基质的乳膏及软膏 ，操作比较繁琐，结果不易判断。经过反复多次实验，积累了一些简便易行的方法。现介绍 如下，供同行们参考。
1 取样
按中国药典规定，抽样量为检验量的3倍，因自制制剂周转快，若不及时留样，检品就有 可能漏检。检验量为两个最小包装。而有时，一个制剂有两个包装规格，取样时两个包装规 格都应各取两个检品，以避免容器的污染造成检品不合格。
2 培养基及其制备方法
采用的培养基，均为干燥粉末型。临用时按标签配制即得。其中，营养琼脂培养基作为检 查细菌总数用。培养基为本白色，而半固体制剂的供试品不易分散均匀，在注入平皿培养后 ，易产生白色颗粒雾状物，无法与菌落区别，因此我们采用0.001% TTC(2，3，5氯化三苯四氮唑)肉汤琼脂培养基，使菌落着色，便于识别计数。配制方法参照《药品卫生检验方 法》。
3 供试液的制备
3.1 水包油型乳膏剂 采用常规法分散。配制样品稀释液50ml(含1%聚 山梨酯80的生理盐水)在试管中，115°C 30min灭菌。当检验时，在无菌条件下直接将5g样 品称入试管中，充分搅拌或振摇，制成1∶10的供试液。
3.2 软膏及油包水型乳膏剂 采用均质器分散。均质器为SJ-Ⅱ型食品均质器，由主机、均质瓶、均质瓶盖、不锈钢刀轴 等组成。配制样品稀释液150ml(90ml生理盐水∶45ml聚山梨酯80∶15ml液体石蜡)。一起置 均质瓶中，115°C 30min灭菌。操作时，在无菌条件下将样品15g称入均质瓶中，装上已灭 菌的不锈钢刀轴，旋紧瓶盖，置均质器上，转速3000r.min-1，旋转1min，分散乳化 完全，即得1∶10的供试品。
4 检查
4.1 细菌、霉菌与酵母菌 计数方法采用平皿菌落法。一般新制剂采用连续三级10倍稀释法，稀释成1∶10，1∶100，1∶1000的供试品。而在检查原料、生产条件都相对固定的自制制剂时，我们通常 只稀释1～2个1 0倍稀释度，使平均菌落数在30～300个之间。有时1∶10的稀释度菌落数就低于30个，若再稀 释供试品就没有意义了。
4.2 控制菌检查 按照中国药典1995年版操作，一般进行增菌培养和分离培养。若未见可疑菌落，即可判断 结果，否则将继续进行检查。
5 小结
5.1 半固体制剂供试液的配制，中国药典采用油相和水相分别灭菌， 检查时再合并使用。我们在实验中，将水包油型乳膏剂的稀释液配在试管中，一是体积小， 便于在手提式高压锅中灭菌；二是因为水包油型制剂，与水亲和力大，可以不用均质器就较易分散均匀，取样方便。
5.2 将油包水型乳膏剂和软膏的稀释液(生理盐水∶聚山梨酯80∶液体石蜡)一起配制在均质瓶中 灭菌。灭菌后趁热充分振摇，使两相混合均匀。使用前，保温在45°C左右。经多次实验证 明，这样处理的稀释液完全可以达到无菌的效果，且操作方便，步骤简单，减少了污染机会 。
5.3 在半固体制剂微生物限度检查中，我们对含有抗生素或抑菌成分的样品，目前还无较好的方 法。中国药典采用稀释法、离心沉淀集菌法、薄膜过滤法等，对溶液剂制剂较易进行，而软 膏粘性太大，操作费时费力，极易污染检品。今后应寻找更实用可行的检验方法。
上一篇：免疫血清对旋毛虫感染性幼虫侵入肠上皮细胞及其发育的影响
下一篇：瘤胃内分解纤维素细菌的分离与鉴定
