卵黄高盐培养基的改进

卵黄高盐培养基的改进

余彦玲 （湖北省药品检验所． 湖北 武汉 430064 ) 

在长期实践中，我们发现在金黄色葡萄球菌悬液计数时，卵黄高盐平板中的金黄色葡萄球菌数较普通琼脂平板明显减少，且生长慢，需24 h以上才能看见很少的菌落，有时甚至不生长。考虑到氯化钠浓度对金黄色葡萄球菌的影响，我们对该培养基的氯化钠浓度进行了比较测试，以期寻求金黄色葡萄球菌生长的最适氯化钠浓度。 

1 材料 与方法

1.1菌种  金黄色葡萄球菌：CMCC(B) 26003，ATCC6358： 大肠杆菌CMCC(B) 44102；枯草芽胞杆菌CMCC (B) 63501。

1.2 培养基  卵黄高盐培养基：按中国药典( 2000年版)配方，仅改变其中氯化钠用量： A0.5％； B 1.5 ％； C 3.0％；D 5.3％。普通琼脂培养基：按中国药典( 2000版) 配方。

1.3 方法

1.3.1 卵黄高盐平板对金黄色葡萄球菌生长的影响 用普通琼脂平板和卵黄盐琼脂平板分别取金黄色葡萄球菌稀释液计数， 比较菌落生长数： 

1.3.2 不同浓度氯化钠对杂菌的抑制作尉 将大肠杆菌、枯草芽胞杆菌稀释液划线于4种氯化钠含量的卵黄高盐琼脂平板，观察其抑制作用。

1.3.3 不同浓度氯化钠对金黄色葡萄球菌的影响  将金黄色葡萄球菌稀释成适宜浓度，分别划线于 A、B、C、D卵黄琼脂平板，( 36 ±1 ) ℃培养16-24h，观察结果。 

2 结果

普通琼脂平板上的金黄色葡萄球菌菌落数为123个， 卵黄高盐平板的菌落数为54个：不同浓度氯化钠对杂菌的抑制作用及对金黄色葡萄球菌的影响， 见表1，表2 ： 

表1 卵黄高盐平板杂菌计数比较

表2 不同浓度氯化钠对金黄色葡萄球菌的影响

3 讨论

金黄色葡萄球菌能耐高盐．而其他菌无此特性．借此以高盐培养基来分离金黄色葡萄球菌是许多分离培养基设计依据。卵黄高盐中的氯化钠是选择性抑菌剂，以0.5％，1.5％，3.1 ％，5.3％各浓度测试，加入大肠杆菌与枯草芽胞杆菌作菌数比较，结果平板上生长的菌数未见明显差异，均不能有效地抑制两种菌的生长。实验结果表明， 含盐为0.5％，l.5％，3.0 ％的培养基优于5.3％( 中国药典配方) 。含氯化钠1.5％的培养基从金黄色葡萄球菌的色素， 大小乳浊来观察优于其他3种氯化钠浓度的培养基；含氯化钠3％的次之；含氯化钠0.5%的培养基，生长的金黄色葡萄球菌色素浅，乳浊周不明显；5.3％的氯化钠培养基明显地对金黄色葡萄球菌呈现抑制作用，菌落小，生长慢，24h后才能观察结果(其他菌均在16h左右可观察结果)乳浊圏不明显．不易计数：提示金黄色葡萄球菌分离培养基需含一定浓度氯化钠，不宜过低，也不宜过高，以1.5%左右为好。

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