《水生微生物实验法》——红螺菌属的富集培养与分离

(十六）红螺菌属的富集培养与分离

其中包括红色红螺菌（ 或称深红红螺菌）、度光红螺菌、巨大红螺菌、长形红螺菌、纤细红螺菌（或称细小红螺菌）、棕黄色红螺菌（或称黄褐红螺菌），此类细菌均生长于水和淤泥中，属厌氧或微嗜氧菌，在厌氧条件下．于光亮中能合成有机物．细胞螺旋状盘绕，长度不一，有不等数蜷曲．同种细胞的大小变化很大，有端生丛毛，能运动。细胞内含有菌紫素。菌绿素和类胡罗卜素等．故细菌呈红色、褐红色、绛红色或玫瑰色不一。

1 ．富集培养

（1）培养基成分及配制：

NH₄Cl   1.0 克

K₂HPO₄    0.5 克

MgCl₂    0.2克

NaCl    0.1 克

酵母膏   0.1克

H₂O  900毫升

将上面各物溶解于水，在121℃ 蒸汽下灭菌20 分钟。分别制备及过滤除菌下列各液：

①5克碳酸氢钠加50 毫升蒸馏水溶解。

② 乙醇或4%丙氨酸．

③0.1N的磷酸溶液。

在基础培养基中加入碳酸氢钠溶液和1.5-2.0毫升乙醇或50毫升4%丙氨酸．用0.1N的磷酸调pH 至7.0

（2）富集培养：

① 最适的接种物是暴露在光下的富含有机物的淤泥。接种时，放淤泥于50 毫升的带玻璃塞的磨口瓶中．酌量放一层。

② 加满培养基，塞好塞于， 隔绝空气。

③ 置于30 ℃ 的照明箱中培养，培养物放在离照明的25 瓦钨丝灯4 英寸处。

④ 观察   通常在3 天内可见到液体培养基里和淤泥曝光的一侧呈现微红色的生长物。

⑤ 从微红色处取1 毫升的富集培养物，接种于第二瓶的富集培养基中，培养2 天．

2 ．分离培养

（1）培养基成分及配制：从上面的富集培养基中加酵母膏至0.2%，及1.5-2.0克琼脂（但碳酸氢钠应改为2 克），制法同上。

另取Na₂S·9H₂O   1 克，加水10 毫升，于121 ℃ 蒸汽下灭菌15分钟，在调pH 之前将此液加到分离培养基中，分装，灭菌后制成平板或柱状培养基。

（2）接种：取富集培养物于分离平板培养基上划线或涂布接种．或用摇管法于柱状培养基中分离．后者由于硫化钠在培养基深处把氧气迅速消耗，很快就形成厌氧条件。如用前一种分离法，可用焦性没食子酸和碳酸钠造成厌氧条件．或于其他的缺氧条件下培养

挑选具有此类细菌特征的菌落．作穿刺接种，管口塞紧后封蜡，培养，备用。

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