常用培养基配方（四）

成分：
　　蛋白胨 10g
　　氯化钠 5g
　　磷酸二氢钾 0.225g
　　磷酸氢二钠 5.64g
　　蒸馏水 1000ml
　　0.5%氰化钾溶液 20ml
　　pH7.6

制法：将除氰化钾以外的成分配好后分装烧瓶，121℃高压灭菌15min，放在冰箱内使其充分冷却，每100ml培养基加入0.5%氰化钾溶液2.0ml（最后浓度为1：10000），分装于12mm×100mm灭菌试管，每管约4ml，立刻用灭菌橡皮塞塞紧，放在4℃冰箱内，至少可保存两个月，同时，将不加氰化钾的培养基作为对照培养基，分装试管备用。

 

 

试剂：
　　1%盐酸二甲基对苯二胺溶液:少量新鲜配制，干冰箱内避光保存.
　　1%α-萘酚-乙醇溶液。

试验方法：取白色洁净滤纸沾取菌落，加盐酸二甲基对苯二胺溶液一滴，阳性者呈现粉红色，并逐渐加深；再加α-萘酚溶液一滴，阳性者于半分钟内呈现鲜蓝色，阴性于两分钟内不变色。以毛细吸管吸取试剂，直接滴加于菌落上，其显色反应与以上相同。

 

 

成分：
　　硝酸钾 0.2g
　　蛋白 5g
　　蒸馏水 1000ml
　　pH7.4

制法：溶解，校正pH，分装试管，每管约5ml，121℃高压灭菌15min。
　　硝酸盐还原试剂：
　　甲液：将对氨基苯磺酸0.8g溶解于2.5mol/L乙酸溶液100ml中。
　　乙液：将甲萘胺0.5g溶解于2.5mol/L乙酸溶液100ml中。

试验方法：接种后在36±1℃培养1～4d，加入甲液和乙液各一滴，观察结果：硝酸盐还原为亚硝酸盐时于立刻或数分钟内显红色。

注：本试验阴性的原因有三：细菌不能还原硝酸盐；亚硝酸盐继续分解，生成氨和氮；培养基不适于细菌的生长。如欲检查培养基中硝酸盐是否未被分解，可再加入锌粉少许，可使硝酸盐还原为亚硝酸盐而呈现红色。

 

 

试剂：
　　1%盐酸二甲基对苯二胺溶液.
　　1%α-萘酚-乙醇溶液。

试验方法：取37℃（或低于37℃）培养20h的斜面培养物一支，将两种试剂各2～3滴，从斜面上端滴下，并将斜面略加倾斜，使试剂混合液流经斜面上的培养物，如系平板培养物，则可用试剂混合液滴在菌落上。

结果：于2min内呈现蓝色者为阳性。阳性培养物大多数于半分钟内出现强阳性反应，2min以后出现微弱或可疑反应均作为阴性结果。

 

 

试剂：
　　3%过氧化氢溶液：临用时配制。

试验方法：挑取固体培养基上菌落一接种环，置于洁净试管内，滴加3%过氧化氢溶液2ml，观察结果。

结果：于半分钟内发生气泡者为阳性，不发生气泡者为阴性。