细菌药敏试验方法

目前常用的药敏试验方法如下：

1、定性测定的纸片扩散法(disk diffusion test)，K-B法： WHO推荐的全球统一的标准方法。

原理：含有定量抗菌货物的纸睡帖在已接种测试菌的琼脂平板上，纸片中所含的药物吸取琼脂中的水分溶解后便不断地向纸片周围区域扩散，形成递减的梯度浓度。在纸片周围抑菌浓度范围内的细菌的生长被抑制，形成透明的抑菌圈。抑菌圈的大小反映测试菌对测定药物的敏感程度，并与该药对测试菌的MIC呈负相关。

质控：标准菌株的抑菌圈直径应落在预期范围内，如果超出该范围，应视为失控而予以纠正。

影响因素：培养基的质量、药敏纸片的质量、接种菌量、试验操作质量、孵育条件、抑菌圈测量工具的精度和质控菌株本身的药敏特性等均能影响试验结果的准确性。

2、定量测定的稀释法(dilution test)，主要测定细菌对某药的最低抑菌浓度，包括肉汤稀释法和琼脂稀释法。

琼脂稀释法：原理：将不同剂量的抗菌药物加入融化并冷至50℃左右的定量MH琼脂中，制成含有不同递减浓度药物的平板。接种待没测菌（可在一个平板上做多株测定），35℃孵育16－24h，无细菌生长的最低药物浓度为测试菌的MIC。

本试验特点是可同时做多株菌株的MIC测定，结果的重复性优于肉汤稀释法，且易于发现污染或耐药突变菌，是新药证时常用的外药敏试验经典参照标准。

3、E法(E test)，结合了扩散法和稀释法各自的优点。

是结合了扩散法和稀释法各自的优点，操作简便同扩散法，又可以象稀释法一样直接定量测出抗菌药物对测试菌的最低MIC，结果准确，重复性好，但是价格昂贵。