国内外牡丹组织培养技术研究现状四
录入时间:2009-7-2 15:41:53
来源：青岛海博
3.3 在花药和花粉方面的研究
Zenkteler 等（1975 ）研究了P.suffruticos 和P.lutea 花药的离体培养，在培养基MS + 3 ％蔗糖＋500mg/L水解酪蛋白＋lmg/LKT + lmg/L认A 中培养21d 后，观察到多细胞和多核的花粉粒；42d 后，2 ％一3 ％的花粉粒形成了多细胞的胚状体，但它们始终包被着花药外壁，没有完成器官分化。RobertS 和sunderesland 在不添加碳和琼脂的MS 液体培养基中，成功获得了P.delavayi 的花粉胚。但是，由花粉胚分化出器官，从而完成植株再生的过程在牡丹方面尚未见报道。
3.4 组培苗生根能力和生根部位的研究
LBonza ( 1994 ）研究伸长芽的生根能力和生根部位发现，只要不去掉芽基部的腋芽，则未伸长芽的生根能力高于伸长芽，腋芽的生根能力低于主芽。为了保证试管苗出瓶后能有效地进行芽的生长，LBouza 等还对牡丹试管苗的再活化进行了研究，结果表明：移栽前将生根苗于4 ℃ 冷藏，有利于芽的生长。但芽的生长和形成的叶片数有限，腋芽没有进一步的生长，说明通过冷处理使试管苗再活化是有局限性的。同时，由于在人工控制的条件下长期培养或由于培养基中外源激素的加人，组培苗丧失了调节生长家和细胞分裂素代谢的能力，这种代谢干扰在组培苗出瓶后继续存在。
4 存在主要问题与展望
牡丹的育种和繁殖一直是生产和科研的主要内容，也是牡丹走向商品化和产业化的重要前提。但牡丹组织培养技术发展至今，仍存在诸多问题。主要如下：
4.1 褐化现象严重
在牡丹茎尖培养中，80 ％以上都会产生褐色物质，严重时导致植物材料死亡。众多问题中，褐化就是其中最主要的瓶颈之一，因此对褐化的防止不容忽视。
4.2 玻璃化现象
玻璃化是植物组织培养过程中的一种生理失调和生理病变，在牡丹组培过程中也普遍发生。整体植物与受冻害植株极其相似，从外部叶片坏死井逐渐发展到整株坏死，给牡丹组培带来极大的浪费。
4.3 生根率低和生根质量不高
生根问题是牡丹离体快繁中存在的主要问题，也是制约牡丹离体快繁体系建立的最大瓶颈。一是生根率不高，甚至一些品种尚未获得生根苗；二是生根质量不高，部分不定根由愈伤组织产生，根与茎中间形成离层，缺乏疏导组织的联系，且不定根易脱落，影响了下一步的移栽工作。
4.4 牡丹组培苗移裁成活率低
这需要从内源激素和生理的角度进行分析解决，尤其是移栽成活率低，是牡丹组织培养最大的限制因子，是急需进一步研究和解决的难题。
尽管牡丹的组织培养技术仍存在许多需要研究和解决的问题，并且这些问题的解决可能需要很长一段时间才能实现，但该技术应用于生产实践、服务于生产实践已成为必然趋势。组织培养及生物技术的发展，将为牡丹育种和繁殖生产提供更广阔、更高效、更便捷的途径，为加速牡丹育种和繁殖提供重要的技术基础。离体快繁技术和愈伤再生途径将为结实困难的牡丹品种提供了一条新的繁殖途径。胚珠和胚培养技术用于辅助育种，可以缩短育种年限，挽救杂种胚，提高育种效率。体细胞胚发生技术将为牡丹繁殖及通过生物技术进行牡丹育种创造条件。因此，牡丹组织培养的成功实现，道路虽然是曲折的，但前途却是光明的。
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