冬青苦丁茶树组织培养的研究二

录入时间:2009-6-24 15:40:09 来源：青岛海博

2. 结果与分析
基本培养基对腋芽萌发的影响
外植体Ⅳ置于如表2所示的培养基上培养，腋芽都能萌发生长，2种外植体芽的平均萌动率大小及萌动时间的早晚顺序是E4、E2、E3、El。在E4培养基上的外植体节间较长，展叶最快，小苗健壮；E2、E3培养基诱导的小苗茎段粗壮，节间短，叶片较厚；在El培养基上诱导的小苗节间短，生长较缓慢，基部生长无叶柄的叶片较多。
2.2不同激素组合对腋芽萌动及生长的影响
以2008年5月的外植体Ⅳ 接种在表3所示的培养基上培养，腋芽萌动快慢和萌动率大小最佳是E4、E8培养基。
2.3不同叶位的外植体芽萌发生长的差异性
外植体I、Ⅱ 、Ⅲ 、Ⅳ 、V分别置于E4培养基上培养（表4）。5种外植体褐化率大小顺序是I、Ⅱ 、Ⅲ 、Ⅳ 、V，外植体Ⅲ 萌动最快，外植体I萌动最晚。外植体Ⅲ 、Ⅳ 萌动天数短，萌动率较高。

2.4不同季节材料腋芽萌动的差异性将2008年5、8、10月取材的外植体Ⅳ 分别置于E4培养基上培养，从表5可看出，外植体萌动率及萌动快慢均为5月＞8月＞10月，但污染率8月份最高，其次是5月、10月。
2.5不同培养基对试管苗增殖的影响

将试管苗外植体Ml、MZ、M3分别接至E12、E13、E14培养基上培养（表6 ) , 40d后外植体MI都未诱导出愈伤组织。在E12、E13培养基上培养的外植体MZ，其茎段基部都形成了愈伤组织，培养20d左右，外植体上的腋芽都处于萌动状态，随后生长旺盛；而在E14培养基上培养的外植体未诱导出愈伤组织，腋芽萌动比E12、E13慢。在E12、E13培养基上培养的外植体M3，其茎段切口处都形成愈伤组织，顶芽生长，但顶芽下的腋芽未见萌发生长；在E15培养基上的外植体未能诱导出愈伤组织，顶芽虽能生长，但长势弱。
2.6小苗生根培养对移栽成活的影响
试管苗置于E15培养基上培养10一15d后，移栽于蛙石中，在25一 30℃ 气温条件下半月左右即可发根，然后栽植土壤中，基本可以成活。

3 讨论
在B5、MS、MT和改良White 4种培养基的对比试验中，MT培养基培养的外植体，腋芽萌发率最高，萌发速度最快，可能是MT培养基的的无机成分、维生素等的组合较适合冬青苦丁茶生长。
在许多植物组织培养中，外植体本身的生理状况、休眠深度与植株再生相关。研究发现，5月份取材的外植体腋芽萌动最快，萌动率最高；10月份取材的外植体腋芽萌动最慢，萌动率最低；8月份取材的外植体的腋芽萌动时间、萌动率介于5月和10月份之间，但污染率高。苦丁茶树系高大乔木，有很强的顶端优势。外植体随着木质化程度的增加，褐变率降低，萌动时间缩短，萌动率提高，但已形成驻芽的外植体芽萌动时间延长。研究中以顶芽下4一6叶位的外植体萌动时间最短，萌动率最高，这可能与苦丁茶树生长特性有关。因此笔者认为，苦丁冬青的茎段培养宜在春季取半木质化的材料作为外植体培养。

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