中林美荷杨的组织培养

1 植物名称 中林美荷杨（Populus sp.）。
2 材料类别 当年生嫩枝叶柄
3 培养条件分化培养基：（1）MS+6-BA0.4mg·L-1（单位下同）；（2）MS+6-BA0.4+NAA0.05。壮苗培养基：（3）MS+6- BA0.2+NAA0.1+GA0.2。生根培养基：（4）1/2MS+IBA0.2；（5）1/2MS+IAA1.0。以上除生根培养基外均加入蔗糖 30%，生根培养基加蔗糖1.5%和琼脂0.7%，PH5.8~26.0。培养温度26~28℃，光照时间16h·d-1,光照度1600lx。 4 生长与分化情况
    4.1 无菌材料的获得从当年生嫩枝上取新生叶柄（不含叶片），置烧杯中用自来水冲洗30min，在超净工作台中先用70%酒精表面消毒30s，无菌水冲洗遍，再用0.1%升汞搅动处理5min，无菌水冲洗3-5遍。将叶柄切成0.5~1.0cm的小段接种于分化培养基（1）、（2）中。
    4.2 丛生芽的诱导及增殖外植体接种约15d后，叶柄切口两端开始膨大，并有绿色芽点产生，继续在该培养基上生长约15d后能看见0.5cm高的不定芽丛。一般 30d继代1次，增殖倍数6~8。用1个单芽继续在培养基（1）、（2）上分化，20d继代1次，其增芽倍数在10以上，有所增加。
    4.3 芽的伸长及根的生长 将产生的丛芽从外植体上切下，分割成单芽接入培养基（3）中壮苗，并增加其木质化程度，待形成较健壮小植株后移于培养基（4）、（5）中生根。15d后生根率达90%以上，每株约有4~6根。
    4.4 试管苗移栽 再生苗先在室温、自然光的环境下锻炼10d后，打开瓶塞锻炼3d，小心取出，洗净根上培养基，移于沙土和蛭石（3：1）的混合基质中，保证湿度，控制温度，其成活率在70%以上。
    5 意义与进展中林美荷杨是杨柳科杨属植物，是近年来中国林业科学院以北美“黑杨”与欧洲“荷兰杨”杂交培育成功的一种新的速生杨优良树种。其适应性强、雄性、不飞絮，生长速度快、抗寒、抗旱、耐瘠薄和抗病虫害（如抗光肩星天牛）等。当年生的幼龄杨木材清白、纤维长（1.009~1.190mm），加工性能好，是用作造纸、绿化和饲料的好材料，具有广泛的应用前景。但此品种的抗盐碱性较差，建立高效组培再生系统，对用中林美荷杨为转化受体，进行抗盐基因的遗传转化，提供了技术基础。中林美荷杨组培尚未见报道。

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