出口食品中霍乱弧菌检验方法

一、培养基明细：
   名称                         规格                  价格（元）
碱性蛋白胨水（APW）           250g                     70
TCBS琼脂                      250g                     95
三糖铁琼脂（TSI）             250g                     85
双糖铁琼脂（KIA）             250g                     85
T1N1琼脂                      250g                     85
精氨酸葡萄糖斜面琼脂（AGS）   100g                     385
Hugh-Leifson葡萄糖肉汤（HLGB）  *                       *
MR-VP肉汤                     20支                     15
ONPG胨水                      20支                     35
Andrade氏糖类肉汤             250g                     80
Andrade氏指示剂               100ml                    50
氧化酶试剂                     1g                      50  
粘丝试验溶液                    *                       *
革兰氏染色液                   5ml*8                    40
5%红细胞生理盐水                *                       *
50万单位多黏菌素B纸片           *                       *
10ug和150ugO/129纸片            *                       *
霍乱弧菌诊断血清（O1群）       1ml*12                   480
霍乱弧菌诊断血清（O139群）      1ml                     50
二、备注：
1、依据SN/T 1022—2001出口食品中霍乱弧菌检验方法 适用于出口水产品及其它食品的检验。
2、术语：
   霍乱弧菌：为革兰氏阴性菌，菌体弯曲呈弧状或逗点状，菌体一端有单根鞭毛和菌毛，无荚膜与芽胞。经人工培养后，易失去弧形而呈杆状。细菌运动极为活泼，呈流星穿梭运动。营养要求不高，在PH8.8～9.0的碱性蛋白胨水或平板中生长良好。因其他细菌在这一PH不易生长，故碱性蛋白胨水可作为选择性增殖霍乱弧菌的培养基。在碱性平板上菌落直径为2mm,圆形，光滑，透明。　
 　霍乱弧菌能还原硝酸盐为亚硝酸盐，靛基质反应阳性，当培养在含硝酸盐及色氨酸的培养基中，产生靛基质与亚硝酸盐，在浓硫酸存在时，生成红色，称为霍乱红反应，但其他非致病性弧菌亦有此反应，故不能凭此鉴定霍乱弧菌。EL Tor型霍乱弧菌与古典型霍乱弧菌生化反应有所不同。前者Vp阳性而后者为阴性。前者能产生强烈的溶血素，溶解羊红细胞，在血平板上生长的菌落周围出现明显的透明溶血环，古典型霍乱弧菌则不溶解羊红细胞。个别EL Tor型霍乱弧菌株亦不溶血。根据弧菌O抗原不同，分成Ⅵ个血清群，第Ⅰ群包括霍乱弧菌的两个生物型。第Ⅰ群A、B、C三种抗原成份可将霍乱弧菌分为三个血清型：含AC者为原型（又称稻叶型），含AB者为异型（又称小川型），A、B、C均有者称中间型（彦岛型）。霍乱弧菌对热，干燥，日光，化学消毒剂和酸均很敏感，耐低温，耐碱。湿热55℃，15分钟，100℃，1～2分钟，水中加0.5ppm氯15分钟可被杀死。0.1%高锰酸钾浸泡蔬菜、水果可达到消毒目的。在正常胃酸中仅生存4分钟。
3、粘丝试验溶液：溶解0.5g去氧胆酸钠于100ml水中，拧紧瓶盖保存于冰箱中，无需高压灭菌。霍乱弧菌在钙溶液中被乳化后，1min内形成粘液状团块。当粘块从玻片上被拉出2cm—3cm时呈粘丝。
4、Hugh-Leifson葡萄糖肉汤（HLGB）：
配方：
蛋白胨                 2.0g
酵母浸粉               0.5g
氯化钠                 30.0g
葡萄糖                 10.0g
溴甲酚紫               0.015g
琼脂                    3.0g
蒸馏水                 1000ml
制法：将各成分（溴甲酚紫除外）加入蒸馏水中，充分混匀，搅拌加热溶解调节pH7.4，加入溴甲酚紫，混匀，分装于15mm*150mm试管的1/3容量，121℃高压灭菌15min。接种后覆盖约1ml灭菌矿物油以检查葡萄糖发酵。   
   

 

上一篇：出口食品中弯曲杆菌检验方法

下一篇：出口食品副溶血弧菌检验方法