出口食品中大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌检验方法

一、培养基明细
     名称                           规格               价格（元）
月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤（LST）    250g                 90
煌绿乳糖胆盐肉汤（BGLB）           250g                 190
EC肉汤                             250g                 90
伊红美蓝琼脂（EMB）                250g                 260
营养琼脂斜面                       250g                 80
色氨酸肉汤                         20支                 15
MR-VP培养基                        250g                 80  
Korser氏枸橼酸盐肉汤               2ml*20               20
结晶紫中性红胆盐倾注（VRBA）       250g                 100
Butterfield氏磷酸盐缓冲稀释液      250g                 195
革兰氏染色液                       5ml*8                40
Kovacs氏靛基质试剂                 5ml*2                20
甲基红指示剂                       5ml*2                20
Voges-pros kauer（V-P）试剂        20支                 15
氯化钠（NaCL）                     500g                  6
二、备注：
1、依据SN 0169—92出口食品中大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌检验方法 适用于出口食品的检验。
2、样品制备：
   以无菌操作取有代表性的样品。如有包装则用75%乙醇在开口处擦拭后取样。若不能及时检验，应将冷冻样品置于-15℃保存，非冷冻而易腐的食品，应置于-4℃冰箱保存。检验前冷冻样品可于2—5℃ 18h内解冻，或在45℃以下15min内解冻。
（1）液体食品样品匀液的制备：
     以灭菌吸管取样25ml放入装有225ml稀释剂的灭菌玻璃瓶（瓶内预置适当数量的玻璃珠），以30cm幅度、于7s内振摇25次（或以机械振荡器振摇），制成1：10的样品匀液。
（2）固体和半固体食品样品匀液的制备：
     以无菌操作称取25g样品，放入装有225ml稀释剂的灭菌均质杯内，于3000r/min均质1—2min，制成1：10的样品匀液（也可用灭菌乳钵研磨的方法代替）。 
3、术语：
（1）大肠杆菌：大肠杆菌（Escherichia coli，E.coli） 革兰氏阴性短杆菌，大小0.5×1～3微米。周身鞭毛，能运动，无芽孢。能发酵多种糖类产酸、产气，是人和动物肠道中的正常栖居菌。大肠杆菌是人和许多动物肠道中最主要且数量最多的一种细菌，主要寄生在大肠内。它侵入人体一些部位时，可引起感染，如腹膜炎、胆囊炎、膀胱炎及腹泻等。人在感染大肠杆菌后的症状为胃痛、呕吐、腹泻和发热。感染可能是致命性的，尤其是对孩子及老人。
（2）大肠菌群：大肠菌群是指一群好氧及兼性厌氧,在37℃、24h能分解乳糖产酸产气的革兰氏阴性无芽孢杆菌,它主要包括肠杆菌科的大肠埃希氏菌、枸椽酸杆菌、克雷伯氏菌和阴沟肠杆菌。它主要来源于人畜粪便,通常可作为水体粪便污染的指标菌。
（3）粪大肠菌群：总大肠菌群中一类在46℃、24士2h培养下仍然能够产酸产气的、厌氧或者兼性好氧的G-杆菌。   
   

 

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