一、基本原理
各种菌对氧的要求是不同的，根据它们对氧的要求或所能耐受的量可将细菌分为四个类型。专性好氧菌必须在有氧的情况下生存，例如枯草芽孢杆菌；专性厌氧菌则要求在完全无氧的条件下生长繁殖，分子氧对它们有害，例如破伤风梭菌（Clostridiumtetani）、丙酮丁醇梭菌（C．acetobutylcum）等；兼性厌氧菌无论在有氧或无氧的情况下均能生长，一般在有氧情况下生长快，例如酵母菌、肠道杆菌等属于兼性厌氧菌；微好氧菌适宜于在氧浓度较低的环境中生长，例如链球菌属中的个别种。
本实验采用深层琼脂法来测定氧对细菌生长的影响，在葡萄糖牛肉膏蛋白胨琼脂培养基试管中接入某种细菌，通过适宜的培养条件，若细菌只生长在培养基表面，则为好氧菌；只生长在培养基底部，为厌氧菌；若表面及全部培养基中都生长，为兼性厌氧菌；生长在培养基中上部，为微好氧菌（图Ⅸ-2）。这样，根据细菌在试管培养基中生长的部位，就可以判断各种细菌对氧的需要程度。
二、器材
大肠杆菌，枯草芽孢杆菌，丙酮丁醇梭菌；
肉膏蛋白胨琼脂试管培养基4支。
三、操作步骤
1．将肉膏蛋白胨琼脂培养基试管置于水浴锅中加热溶化。
2．待培养基冷却至50℃左右时，按无菌操作分别用接种环接种大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、丙酮丁醇梭菌各一环于试管培养基中，另一支试管中不接种作对照。搓动试管，使细菌均匀混于培养基内。
3．待凝固后，置于28℃温室中培养48小时后开始观察，连续观察几天，直至结果清晰时为止。
四、实验报告
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