附录 A 培养基和试剂的配制
A1 碱性蛋白胨水（APW）
蛋白胨 10.0g
氯化钠 10.0g
蒸馏水 1 000mL
混匀后，调节pH值至（8.5±0.2），分装225mL于250mL广口瓶中，121℃高压灭菌10min。
A2 TCBS琼脂
酵母浸膏 5.0g
蛋白胨 10.0g
蔗 糖 20.0g
硫代硫酸钠·5H2O 10.0g
柠檬酸钠 ·2H2O 10.0g
牛胆酸钠 3.0g
牛胆汁 5.0g
氯化钠 10.0g
柠檬酸铁 1.0g
溴麝香草酚蓝 0.04g
麝香草酚蓝 0.04g
琼 脂 18.0g
蒸馏水 1 000mL
除指示剂外,将各种成分加热溶解,调至pH8.6,加入指示剂。此培养基不必高压灭菌,煮沸1～2min,分装20mL于15mm×100mm平皿内。
A3 三糖铁琼脂（TSI）
牛肉浸膏 3.0g
蛋白胨 20.0g
乳 糖 10.0g
蔗 糖 10.0g
葡萄糖 1.0g
硫酸亚铁 0.5g
氯化钠 30.0g
琼 脂 12.0g
酚 红 0.024g
除琼脂和酚红外,将其他成分用蒸馏水400mL微火加热溶解,同时将琼脂置于600mL蒸馏水中,浸泡数分钟后,加热煮沸使完全溶解。然后将以上两液混合均匀。调至pH7.4, 加入指示剂混匀,分装于15mm×150mm试管,每管3mL～4mL,115℃高压灭菌15min。灭菌后摆成斜面,使高层和斜面各约3cm。
A4 双糖铁琼脂（KIA）
牛肉浸膏 3.0g
酵母膏 3.0g
月示蛋白胨 15.0g
蛋白胨 5.0g
乳糖 5.0g
葡萄糖 1.0g
硫酸亚铁 0.2g
氯化钠 20.0g
硫代硫酸钠 0.3g
琼脂 12.0g
酚红 0.024g
蒸馏水 1 000mL
将各成分溶解于蒸馏水中，充分混匀，搅拌加热，煮沸约1min。最终pH（7.4±0.2）。分装13mm×100mm试管，121℃高压灭菌15min。放置高层斜面备用。
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