涂片染色能查到结核分枝杆菌者，一般需要每毫升痰液内含菌量至少500个以上，甚至需达到5万以上，所以结核患者痰标本直接涂片染色阳性率很低，经浓缩集菌后再进行染色镜检可显著提高检测的阳性率。
【材料】 结核患者24小时痰液，细口瓶，0.02%酚红液、汽油或二甲苯，0.5%或4%氢氧化钠，无菌0.9%氯化钠溶液等。
【方法】
一、漂浮法
1、取24小时痰液15ml，装入细口瓶内，加人2倍量0.5%氢氧化钠摇匀，高压灭菌或煮沸20—30分钟杀菌。
2、待冷后加人汽油或二甲苯2ml，用力振荡20—30分钟，用0.9%氯化钠溶液加至液面与瓶口齐，静置半小时。
3、取瓶口表面油状物涂于载玻片上，微微加热，干后再加，如此重复5—6次，至厚度适宜，烘干待冷，抗酸染色后镜检。
二、沉淀法
1、取痰液1份与2倍量4%氢氧化钠混合，高压灭菌或煮沸20—30分钟后，加入0.02%酚红指示剂0.1ml，剧烈振荡混匀，亦可置37℃水浴消化30分钟。
2、校正pH为7.0，3000r/min离心30分钟，弃去上清液。
3、取沉淀物涂片染色镜检。若进行分离培养和动物接种，则应免去高压灭菌或煮沸的程序。
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