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一、试验原理及用途
用于单增李斯特氏菌的选择分离培养。
哥伦比亚琼脂基础提供氮源和生长因子等营养物质，内含琼脂为凝固剂；细菌分解七叶苷产生七叶素，七叶素与铁离子结合生成黑色物质，形成黑色菌落；柠檬酸铁铵可提供铁元素；氯化锂维持渗透压；粘菌素、拉氧头孢为抑菌剂。
二、培养基配方（g/L）
|
哥伦比亚琼脂基础 |
42.5 |
|
七叶苷 |
1.0 |
|
柠檬酸铁铵 |
0.5 |
|
氯化锂 |
15.0 |
|
粘菌素 |
0.01 |
|
pH值7.2±0.2（25℃） |
|
三、试验方法
1、称取本品59.01g，加热溶解于1000mL蒸馏水中，121℃高压灭菌10分钟，冷至46℃时，加入2mL过滤除菌的1%拉氧头孢溶液，混匀，倾入无菌平皿，备用。
2、接种质控菌株，涂布接种至培养基，胰蛋白胨大豆琼脂培养基（TSA，货号：HB0177-8）作为参比培养基。
3、放置35℃±1℃需氧培养24h-48h。
四、质控结果
接种以下质控菌株，放置35℃±1℃需氧培养24h-48h。如图1所示。
|
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量（CFU） |
回收率 |
生长情况 |
其它特征 |
|
单增李斯特氏菌 |
ATCC 19114 |
10-100 |
≥70% |
+++ |
黑色菌落，有黑色环 |
|
英诺克李斯特氏菌 |
ATCC 33090 |
10-100 |
≥70% |
+++ |
黑色菌落，有黑色环 |
|
大肠埃希氏菌 |
ATCC 25922 |
100-1000 |
/ |
- |
抑制 |
|
金黄色葡萄球菌 |
ATCC 25923 |
100-1000 |
/ |
- |
抑制 |
图1 改良牛津琼脂培养基的原理和使用方法
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注：本文属海博生物原创，未经允许不得转载。
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