一、实验与水质
实验是指对现象所做出的假设推测加以验证的动作。假设能否被证明为真理,与假设能否具有再现性的结果至关重要。实验的再现性除了要有良好的技巧,还受到所用化学试剂的纯度和分析仪器的精密度的影响。实验中用来配制溶液的化学试剂及所使用的水的纯度也非常重要。假设水中污染物对实验检测会造成影响,就必须去除这些物质。此外,为了取得良好的再现性结果,有必要使用能保持稳定水质的纯水。
二、实验用水的制备和分级
实验用水是指由普通水经蒸馏、反渗透、电渗析、微孔过滤、去离子等方法制备得到,在实验室用于试剂配制、样品浸提、器皿洗涤、分析测试和生物培养等操作的水。
实验室水的用途多种多样,除了一般的清洁用水外,分析研究、计量检测等实验中对水的质量具有非常严格的要求,国际标准化组织和国内都制定了实验室用纯水的质量标准。
实验用水分为三个等级:一级水、二级水和三级水。
一级水用于有严格要求的分析试验,包括对颗粒有要求的试验。如高效液相色谱分析用水。一级水可用二级水经过石英设备蒸馏或离子交换混合床处理后,再经0.2μm微孔滤膜过滤来制取。
二级水用于无机痕量分析等试验,如原子吸收光谱分析用水。二级水可用多次蒸馏或离子交换等方法制取。
三级水用于一般化学分析试验。三级水可用蒸馏或离子交换等方法制取。
本文着重介绍配制培养基对水质的要求。
三、培养基配制用水
《GB4789.28-2024食品安全国家标准食品微生物学检验培养基和试剂的质量要求》中,对实验用水做了明确说明:实验用水的电导率在25℃时不应超过25μS/cm(相当于电阻率≥0.04 MΩ/cm),除非另有规定要求。试验用水的微生物污染不应超过103CFU/mL,应按GB 4789.2定期检验微生物污染水平。相关标准可查阅:。
该标准中对于培养基配制过程中出现的质量问题和可能的原因分别做了系统归纳(图1)。
图1培养基配制时出现的异常现象及常见原因分析
从表中可以清晰看到,水质不佳,会导致培养基pH不正确、颜色异常、产生沉淀,甚至会进一步影响微生物的生长。所以,在配制培养基时,一定要保证配制用水的质量。通常用蒸馏水、去离子水即可,不能使用矿泉水,更不能使用自来水,使用不同水质配制的培养基情况如图2.
实验室自制纯化水 品牌纯净水 饮用矿泉水 自来水
图2-1高压灭菌前的培养基状态
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图2-2 高压灭菌后的培养基状态
图2 分别用不同水质配制培养基,灭菌前后的状态差异
从图中可以清晰地看到,使用自来水配制的培养基,不如用其它水质配制的培养基澄清透明(图2-1),灭菌后非常浑浊导致培养基不能使用,矿泉水配制的培养基沉淀物业比较多(图2-2),并且水中本来含有的一些离子也会对培养基的性能产生影响。
在实验过程中,如果出现配制的培养基不澄清、有沉淀的现象,要首先确认实验室用水是否合格,然后再进一步查找其它原因。
四、注意事项
如果是实验室自己制备纯化水等,则应加强对纯水的各个生产工艺程序的科学管理,重视对各工序工作人员的技术培训,严格按操作规程生产,维护生产仪器正常、安全、无污染,有利于产出水的水质稳定性。
相关标准:
《GB4789.28-2024食品安全国家标准食品微生物学检验培养基和试剂的质量要求》 点击查看
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