一、 产品用途
用于O157菌的选择性分离培养(GB/T4789.36-2008，GB4789.28-2013)。
二、培养基配方（g/L）：
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蛋白胨 |
20.0 |
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山梨醇 |
10.0 |
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三号胆盐 |
1.5 |
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氯化钠 |
5.0 |
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中性红 |
0.03 |
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结晶紫 |
0.001 |
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琼脂 |
15.0 |
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pH7.2±0.2 25℃ |
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此配方可以进行改良或增加营养成分以获得最佳的结果
三、试验原理:
蛋白胨提供氮源、维生素和生长因子；氯化钠维持均衡的渗透压；山梨醇为可发酵的糖类；三号胆盐、结晶紫抑制革兰氏阳性菌，亚碲酸钾抑制非0157的大肠杆菌，头孢克肟抑制变形杆菌；中性红为pH指示剂；琼脂是培养基的凝固剂。
四、试验方法:
1.称取本品51.5g，加热溶解于1000ml蒸馏水中，分装三角瓶，每瓶200ml，121℃高压灭菌15分钟，冷却至45℃±1℃左右时，加入一支改良山梨醇麦康凯琼脂添加剂（含头孢克肟0.01mg，亚碲酸钾0.5mg），混匀，倾入无菌平皿，备用。
2.制备质控菌液，选择合适稀释度的目标菌质控菌液0.1ml，均匀涂布于平板上，每一稀释度接种两个平板。
3.用1μL接种环取非目标菌质控菌液1环，将接种环接触容器边缘3次去除多余液体，在平板表面用三区法或六线法划线，同时接种两个平板。
五、试验结果：
接种以下质控菌株，36±1℃培养24-48h：
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质控菌株 |
菌株编号 |
接种量 (CFU) |
参比或计数培养基 |
方法 |
质控评定标准 |
其他特征 |
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金黄色葡萄球菌 |
ATCC6538 |
/ |
/ |
半定量 |
G≤1 |
/ |
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大肠埃希氏菌O157：H7 |
ATCC35150 |
20-200 |
TSA |
定量 |
PR≥0.5 |
无色菌落，褐色中心 |
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伤寒沙门氏菌 |
ATCC14028 |
/ |
/ |
定性 |
- |
无色菌落 |
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大肠埃希氏菌 |
ATCC25922 |
|
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定性 |
- |
粉红色菌落，周围有胆盐沉淀 |
六、方法的局限性:
本培养基仅为细菌鉴定的一部分，需做其他补充试验。
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