同步分培养就是通过一定的手段,使培养物中所有的细胞处于同一生长阶段,使群体与个体的行为保持一致。主要用在实验室中进行微生物细胞的生理生化研究。
同步分裂培养的方法主要有两种:
诱导法和选择法。
(1)诱导法
控制培养的物化条件(如温度、营养物),诱使细胞同步生长的方法。
如果让菌体在低于或高于最适生长温度的环境下培养段时间,这些细胞缓慢生长,但不发生分裂,然后,再将培养温度恢复到最适生长温度,这大多数细胞就会同时进行分裂。
通过改变培养基成分来获得同步培养物。例如限制碳源或其他营养物,使细胞只能进行一次分裂而不能继续生长,从而获得刚分裂的细胞群体,然后转入适宜的培养基中,它们便进入同步生长。对于营养缺陷型菌株,可以通过控制它们所缺乏的某种营养物质而达到同步化。
(2)选择法
通过差速离心或过滤等手段,将处于不同生长阶段的细胞分开,从而实现同步培养。
选择法适用于不同生长阶段的细胞大小和比重有明显差异的微生物种类。不会影响菌体的正常代谢,获得的菌体活力正常。硝酸纤维素薄膜法是一种较为巧妙的操作方法。
需要注意的是,细胞个体之间差异总是存在的,这些差异随着分裂次数的增加就会逐渐增大,所以无论是诱导法还是选择法,获得的培养物最多只能同步分裂4~5代,有的仅能维持一代。
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