一、产品用途及原理

  用于药品和生物制品中支原体检测。

  猪胃消化粉、牛肉浸粉、酵母浸粉提供氮源、维生素、氨基酸和生长因子，氯化钠可维持均衡的渗透压，葡萄糖是可发酵的糖，L-精氨酸是可水解的氨基酸，酚红为指示剂。

二、培养基配方（g/L）

三、口腔支原体检查依据

  口腔支原体检查法在2020年版《中华人民共和国药典》中体现，要求使用精氨酸支原体肉汤培养基培养检测口腔支原体。具体操作要求为：将口腔支原体稀释至10-3-10-5，接种在精氨酸支原体肉汤培养基中，每个稀释度接种3支试管，置于36℃培养7-14天，观察培养基变色结果。口腔支原体可以利用培养基中的精氨酸，使培养基pH值升高，遇指示剂酚红使培养基变红。

四、试验方法

  1、称取本品25.52g，加热溶解于800mL蒸馏水中，121℃高压灭菌15分钟，冷至室温，无菌操作加入灭活小牛血清或马血清200mL和青霉素80万单位，混匀，分装无菌试管，备用。

  2、制备质控菌株，接种至培养基中，做10倍系列稀释，稀释至10-9，并做空白对照。

  3、放置于36℃±1℃恒温培养箱中，微需氧培养7-14天。

五、质控结果

接种以下质控菌株，放置于36℃±1℃恒温培养箱中，微需氧培养7-14天。口腔支原体培养至7天的灵敏度为7，如图1所示。

图1 精氨酸支原体肉汤培养基培养口腔支原体7天的灵敏度

六、试验注意事项

  1、若使用非一次性试管等容器进行试验，容器使用前应使用蒸馏水冲洗干净，确保无洗涤液等残留物，以免增加试验的不确定性或污染。

  2、灭菌结束后，试管口会有水珠，在进行梯度稀释时，水珠很容易与空气中的细菌接触以致污染，因此，试管口应灼烧至干燥，胶塞也需过火，振荡操作后，若培养基接触到胶塞，还需再次进行灼烧操作。

  3、调节pH时，使用的酸碱试剂均应是灭菌后的。

  4、支原体培养前应使用封口膜封口，可提供微需氧环境以及降低污染的风险。

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