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煌绿磺胺吡啶琼脂培养基的原理及使用方法

张立鑫
录入时间:2024-2-6 14:14:42 来源:青岛海博生物

一、产品原理及用途

  沙门氏菌属肠杆菌科,革兰氏阴性肠道杆菌。不液化明胶,不分解尿素,不产生吲哚,不发酵乳糖和蔗糖,能发酵葡萄糖、甘露醇、麦芽糖和卫芽糖,大多产酸产气,少数只产酸不产气。

  用途:用于食品中沙门氏菌选择性分离培养。

  原理:多价胨和酵母浸粉可提供氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;乳糖、蔗糖为可发酵糖类;苯酚红为酸碱指示剂,pH变色范围为:6.8(黄)-8.4(红),能发酵糖产酸的,菌落呈黄色,不发酵糖的为红色;琼脂是培养基的凝固剂;煌绿抑制革兰氏阳性菌和大多数非沙门氏菌的革兰氏阴性杆菌,通常抑制发酵乳糖、蔗糖的细菌;磺胺嘧啶抗菌谱较广,葡萄球菌、大肠杆菌、霍乱弧菌、变形杆菌等对磺胺吡啶中度敏感。


二、培养基配方(g/L)

多价胨

10.0

酵母浸粉

3.0

氯化钠

5.0

乳糖

10.0

蔗糖

10.0

苯酚红

0.08

琼脂

20.0

煌绿

0.0125

磺胺吡啶

1.0

pH值6.9±0.2(25℃)


三、试验方法

  1、称取本品59.1克,加热搅拌溶解于1000mL蒸馏水中,121℃高压灭菌15分钟,冷至50℃-55℃时,倾入无菌平皿,备用。

  2、制备质控菌液接种于培养基。

  3、放置于35℃±2℃需氧培养18h-48h,观察试验结果。


四、质控结果

  接种以下质控菌株,放置于35℃±2℃需氧培养18h-48h。结果如图1。注:回收率计算时,用TSA琼脂做参比培养基。

质控菌株

菌株编号

接种量(CFU)

回收率

生长情况

其他特征

鼠伤寒沙门氏菌

ATCC 14028

10-100

≥70%

+++

粉红色至红色菌落

肠炎沙门氏菌

CMCC(B) 50760

10-100

≥70%

+++

粉红色至红色菌落

大肠埃希氏菌

ATCC 25922

100-1000

<10%

-/+

黄绿色菌落

粪肠球菌

ATCC 29212

100-1000

/

-

抑制

普通变形杆菌

ATCC 13315

100-1000

/

-

抑制


图1 煌绿磺胺吡啶琼脂培养基微生物质控结果


五、注意事项

  该培养基倒板冷却后平板整体呈棕黄色,在接菌试验完毕进行菌落计数时,可能不易辨别红色菌落,可使用灯检箱或打辅助光等方式进行计数。


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注:本文属海博生物原创,未经允许不得转载。

 

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