一、试验原理:
该培养基用于大肠埃希氏菌O157:H7/NM的选择性增菌培养。
蛋白胨提供微生物生长所需的碳源、氮源、维生素和生长因子;乳糖为可发酵碳水化合物,可作为一种能量来源;3号胆盐可抑制革兰氏阳性菌的生长;氯化钠维持均衡的渗透压;结晶紫对革兰氏阳性菌如葡萄球菌、白喉杆菌,以及绿脓杆菌、白念珠菌、表皮癣菌有杀灭作用,对其他革兰氏阴性菌和抗酸菌几乎无作用;中性红为指示剂。
添加剂:每瓶需配套添加10盒HB8659a改良麦康凯肉汤添加剂使用,每200mL改良麦康凯肉汤添加1支添加剂。
二、培养基配方(g/L):
蛋白胨 |
20.0 |
乳糖 |
10.0 |
3号胆盐 |
1.5 |
氯化钠 |
5.0 |
中性红 |
0.03 |
结晶紫 |
0.001 |
pH值7.2±0.1(25℃) |
三、试验方法:
1. 称取本品36.5g,加热搅拌溶解于1000mL蒸馏水中,分装三角瓶,每瓶200mL,121℃高压灭菌15分钟,冷却45℃±1℃时,加入1支改良麦康凯肉汤添加剂,混匀,分装无菌试管,每管9mL,备用。
2. 10倍梯度稀释法制备质控菌株菌悬液。
3. 选择适宜稀释度的菌悬液接种于培养基中。
4. 放置于36℃±1℃需氧培养17h-19h,观察试验结果。
四、试验结果判断:
接种以下质控菌株,放置于36℃±1℃需氧培养17h-19h,试验结果如图1所示。
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量 (CFU) |
参比或 计数培 养基 |
生长情况 |
其他特征 |
大肠杆O157 大肠埃希氏菌 金黄色葡萄球菌 |
ATCC 35150 ATCC 25922 ATCC 6538 |
10-100 1000-5000 1000-5000 |
TSA |
在CT-MAC上>10CFU |
菌落无色, 中心灰褐色 |
大肠埃希氏菌 |
ATCC 25922 |
1000-5000 |
TSA |
在TSA上<10CFU |
|
金黄色葡萄球菌 |
ATCC 6538 |
1000-5000 |
TSA |
在TSA上<10CFU |
|
图1 改良麦康凯肉汤(CT-MAC)微生物质控结果
图2 培养液接种的试验结果
相关产品:
注:本文属海博生物原创,未经允许不得转载。