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改良麦康凯肉汤(CT-MAC)原理和使用方法

张辉
录入时间:2023-10-23 15:08:54 来源:青岛海博生物

一、试验原理:

  该培养基用于大肠埃希氏菌O157:H7/NM的选择性增菌培养。

  蛋白胨提供微生物生长所需的碳源、氮源、维生素和生长因子;乳糖为可发酵碳水化合物,可作为一种能量来源;3号胆盐可抑制革兰氏阳性菌的生长;氯化钠维持均衡的渗透压;结晶紫对革兰氏阳性菌如葡萄球菌、白喉杆菌,以及绿脓杆菌、白念珠菌、表皮癣菌有杀灭作用,对其他革兰氏阴性菌和抗酸菌几乎无作用;中性红为指示剂。

  添加剂:每瓶需配套添加10盒HB8659a改良麦康凯肉汤添加剂使用,每200mL改良麦康凯肉汤添加1支添加剂。


二、培养基配方(g/L):

蛋白胨

20.0

乳糖

10.0

3号胆盐

1.5

氯化钠

5.0

中性红

0.03

结晶紫

0.001

pH值7.2±0.1(25℃)


三、试验方法:

  1. 称取本品36.5g,加热搅拌溶解于1000mL蒸馏水中,分装三角瓶,每瓶200mL,121℃高压灭菌15分钟,冷却45℃±1℃时,加入1支改良麦康凯肉汤添加剂,混匀,分装无菌试管,每管9mL,备用。

  2. 10倍梯度稀释法制备质控菌株菌悬液。

  3. 选择适宜稀释度的菌悬液接种于培养基中。

  4. 放置于36℃±1℃需氧培养17h-19h,观察试验结果。


四、试验结果判断:

  接种以下质控菌株,放置于36℃±1℃需氧培养17h-19h,试验结果如图1所示。

质控菌株

菌株编号

接种量

(CFU)

参比或

数培

养基

生长情况

其他特征

大肠杆O157

大肠埃希氏菌

金黄色葡萄球菌

ATCC 35150

ATCC 25922

ATCC 6538

10-100

1000-5000

1000-5000

TSA

在CT-MAC上>10CFU

菌落无色,

中心灰褐色

大肠埃希氏菌

ATCC 25922

1000-5000

TSA

在TSA上<10CFU


金黄色葡萄球菌

ATCC 6538

1000-5000

TSA

在TSA上<10CFU



图1 改良麦康凯肉汤(CT-MAC)微生物质控结果

图2 培养液接种的试验结果


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注:本文属海博生物原创,未经允许不得转载。

 

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